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浅谈各科学在临床医学的作用:微生物学在临床医学的作用
在临床实验中，临床医师应在化验单上写上对病人的猜测性诊断，由此来使临床实验医师进行合理的实验方法和检验的程序，从而采集正确的临床微生物标本；一旦临床实验室有了实验结果和报告时，应及时报告微生物医师，从而确立诊断方案。对于疑难罕见的微生物，临床医师应及时与临床实验室的实验人员进行沟通，从而帮助对微生物标本的判断和实验。对临床和微生物实验室来说，微生物医师对其二者的沟通起到了枢纽作用。举例来说，在微生物实验室进行实验时，若图涂片发生了问题，应由实验室医师及时与临床沟通联系，然后一起探讨原因及结果。临床微生物室可以每隔一段时间派出微生物医师进行对临床微生物感染的讨论。对严重病人，微生物医师要参与对其治疗诊断的探讨。临床微生物室应与各临床科室经常进行意见交流，一同解决有关微生物学的诸多问题。
一现代临床微生物学中对病原学诊断的基本要求包括：
（1）提供的临床标本；
（2）了解正常的菌群；
（3）结合临床，进行实验；
（4）病原学诊断需、合理；
（5）微生物实验室应及时报告实验的结婚；
（6）加强对检验项目的质量控制。
现代感染性疾病诊断最重要的一步为采集恰当的标本，从而要求临床医师能够获取代表感染性疾病的标本。细菌进行实验的前提是了解知晓人体的正常菌群。在做微生物实验时，应联合临床，做定性、定位和定量的实验分析，患者的临床诊断以及恰当的临床实验标本由临床医师提供，然后进行的讨论分析，从而更加的为患者负责。微生物室应在涂片结果，敏感结果以及结果出来时及时与临床医师联系，对病情做有力的报告。现代临床微生物学应对各种检验项目加强质量控制，从而保障检验结果的性。现代临床微生物学要求参与医院感染疾病的监测、管理和控制。临床微生物实验室的作用有：加强对病原学诊断、微生物抗药性以及环境、器械的监测；加强医院的消毒与灭菌；对流行病进行试验，并加以控制。
二临床微生物实验室对医院感染的要求有：
（1）加强对医院感染的监测；
（2）临床微生物室参与医院的教育工作；
（3）对消毒隔离加强管理；
（4）对抗菌性药物进行试验，快速试验的报告。
若在临床实验中发现微生物的感染问题，应及时与临床医师联系沟通，及时与控制感染的科室进行必要的联系；一般提醒临床对于病菌的来源，可在一定程度上预防病菌的传播与扩散；临床微生物实验室要经常定期抽调人员去参与医院进行的教育工作，从而更加的对微生物菌体做出更的判断；正确消毒对微生物菌体的预防和控制非常重要。临床微生物实验室的工作包括正确的对消毒隔离工作进行指导和监察，并且在特殊情况下，参与对特殊耐药细菌的实验工作并制定消毒隔离的措施。临床微生物室应定期对微生物耐药性的监测结果，这将对临床的救治成功率大有帮助。现代临床微生物学在现代医学中对实际临床中的感染控制工作发挥着举足轻重的作用。临床微生物学要求紧密结合与临床之间的关系，并且还要牢牢掌握最基本的知识，对常规的微生物检验工作要快速进行，判断要，并且应即有速度又有质量对实验结果做出报告。
临床微生物学要求实验结果与临床尽可能的相符。临床微生物实验室要加强对教育培训的宣传，并能对在微生物实验室中实验的结果做出合理的解释。现代临床微生物学不仅对于高等院校的学生们，或是对医学工作者的知识更新都是极其有必要的。医院应切实加强医院内感染控制的工作，从而为服务临床做到更好的服务。利用临床微生物学的基础知识以及微生物学的理论与技能来进行临床微生物学的检验。临床微生物学需通过检验系统，从中了解各类微生物的特性，快速、有效的做出对病原学的诊断及微生物检验报告，为治疗、诊断措施提供强有力的科学理论依据。为医学感染控制提供病原学诊断是临床微生物学检验的目的，从而达到减少、避免和控制病原体的效果。微生物实验室工作者应加强对微生物标本的提取工作，然后写出对其的研究报告，为医学临床提供帮助。现代临床微生物学的任务包括：获取标本信息，并且学会妥善保存与保护，提高对微生物的检验率。利用微生物学知识学会多种对微生物检测的方法，从中选出的检测方式，还包括系统鉴定程序，以及对检测中存在的质量控制。
现科学已研究出多种用来研究微生物的机器，对微生物实验室工作者的研究工作提供帮助，奥尼尔对检测的快速、有效性提供了前提的条件。现代临床微生物检验要求三定一结合，即结合临床信息，定量、定位和定性分析微生物，了解机体正常存在的菌种，从而确保微生物标本的有效性与性。目前，现代临床微生物学的检验正朝向器械化、自动化以及分子微生物的方面发展。现代临床微生物学在现代医学感染控制中的作用变得越来越重要，微生物感染可能来源于互相交流间的交叉感染，也可能来源于内源性感染。对微生物感染的控制将是现代医学面临的一大难题，并且一步步得到突破发展。
作者：王丹单位：河北医科大学临床学院
浅谈各科学在临床医学的作用:电泳技术在临床医学的作用
1CE在临床检验医学的应用
1.1血清蛋白质分析
血清蛋白电泳通常是临床上在无论何种原因引起的血液沉降率增加时都需要进行的常规实验检测项目，它将有助于确诊临床报告的炎症或感染的状况及提示进一步检测其他项目。采用CE可分离血清蛋白，并能计算各蛋白质的相对浓度，避免了凝胶电泳法染色、脱色过程中多种影响因素造成的误差，CE法的结果重复性好，可信度高［11］。前清蛋白在血清中的浓度可表明营养状态，且是确定恶性肿瘤、炎症、肝硬化、霍奇金病的重要指标，多数电泳法难以分辨，而用CE法很容易分离定量，检测波长为214或200nm。CE不仅增加了清蛋白部分的分辩率，对双清蛋白血症检测的灵敏度也有了很大的提高。CE提供了足够的在α1区的分辩率以区分α1酸性糖蛋白与α1抗胰蛋白酶。在α2区的球蛋白区，α2巨球蛋白与触球蛋白不易区分，但在β-球蛋白区具有高分辩率［12］。CE法对肾病、慢性感染、自身免疫病和肝硬化等多种疾病的免疫球蛋白分析有较好的优势。
1.2单克隆免疫球蛋白的特征鉴别
单克隆免疫球蛋白是一种过度合成的单一类型或亚型的异常免疫球蛋白。它的产生是由于单一克隆的恶性或高致敏B细胞的无限增殖，从而产生同源性的单克隆免疫球蛋白。单克隆免疫球蛋白组分的检测运用了各种与免疫学、血液学和生物化学等领域相关的技术和仪器。通过用特异性抗体包被的琼脂糖凝胶球消除一个特殊的峰来指示是哪种单克隆成分，借此对免疫球蛋白的型、亚型和轻链型予以鉴定和分类［13］。这一技术提高了对该蛋白组分的分析与研究水平。
1.3血红蛋白成分的分析
在地贫高发区检测出地贫高风险夫妇和预防地贫患儿出生是关系到提高我国出生人口素质和实现优生优育工作的一个重要任务。其中血红蛋白(Hb)电泳是研究和分离异常血红蛋白的有效方法，亦是诊断血红蛋白分子病和地贫不可缺少的手段之一［15］。毛细管电泳法是在充满电泳液的石英毛细管中进行电泳的技术，在溶血试剂中进行稀释的红细胞样品，会被注射到毛细管的负极端，在高压电的作用下竞相电泳分离，然后Hb会被靠近正极端的415nm光波检测装置检测到［16］。通过毛细管电泳将蛋白质分离，采用波长为200nm氘光源和CCD探测器，对血红蛋白成分分析灵敏度和分辨率高［17］。CE是一种敏感度和度较高的分析方法，具有操作简便、检测时间短的优点［18］。通过使用碱性pH缓冲液，正常和异常(或变异体)血红蛋白按下列顺序检测出来，从阴极到阳极依次为:δA''''2(A2变异体)，C，A2/O-阿拉伯血红蛋白(O-Arab)，E，S，D，G费城血红蛋白(G-Philadelphia)，F，A，Hope，Bart，J，N-巴尔的摩血红蛋白(N-Baltimore)和H。在CE区带中不出现碳酸酐酶，不但可以鉴别出HbA2变异体，还能够检测HbA、HbF、HbA2含量以及其他异常血红蛋白，可用于诊断地中海贫血及其他血红蛋白病［19］。
1.4尿蛋白质分析
临床医生和生物学家关注的尿蛋白检查的概念正在逐步更新。蛋白尿的分析得益于近年来重要的方法学的进步，特别是根据分子量和所带电荷来分离蛋白质的电泳技术。当今的生物学技术主要应用电泳方法来检测游离轻链，并用免疫学技术来分析它们的特性。免疫游离轻链是肾脏损害的直接原因，最常见的是肾小管性或系统性。这一毒性的出现可以是在尿中显现沉淀，也可以在间质中沉积。在过去的几年里，有关免疫球蛋白轻链毒性因素方面的认识已有了很大的进展。电泳异常条带位于β或γ区的病例中有三分之二的情况存在本周氏蛋白。一条或多个条带是根据尿液中单克隆免疫球蛋白存在与否进行识别，并且与典型的肾损伤或肾功能不全相关［20］。游离轻链常常沉积在肾小管中，导致肾小管中毒。由于蛋白尿定量与肾脏损害相关，形成蛋白尿的特定蛋白性质就反映了肾单位病变所在的位置和肾功能异常的发病机理。尿中特定蛋白的分析可以认为是如同一个真正的生化活检，它可即刻提供肾单位内部的状况［21］。
1.5肌红蛋白分析
肌红蛋白异常增高常在急性心梗后患者的血液和尿液中出现，而免疫比浊法难以测定低浓度的肌红蛋白。但是，CE可在8min内快速分离尿中低浓度肌红蛋白并与血红蛋白相鉴别。
1.6脂蛋白分析
CE可将血浆脂蛋白分离出14个亚组分，如在分离缓冲液中加入表面活性剂，可在短时间内对2个主要组分:高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)进行定量，对LDL进一步分离为3个亚组分:LDL、中密度脂蛋白(IDL)和极低密度脂蛋白(VLDL)，并对各组分的比例进行推算，从而对脂蛋白异常提供不同脂肪代谢的信息。
1.7糖化血红蛋白(HbA1c)分析
血红细胞中的血红蛋白糖基化部分即为糖化血红蛋白(HbA1c)。HbA1c的水平与测定前数周内的血糖水平呈正线性相关，因此对糖尿病患者测定糖化血红蛋白可了解过去一段较长时间内的血糖水平。此测定并不能作为糖尿病的诊断，但可用于作为控制血糖的指标，糖化血红蛋白的量还可作为评价各种治疗措施效果的标准。应用CE进行HbA1c电泳能分离几种糖蛋白的糖基构型，可鉴别糖化血红蛋白A1、A1c和其他异构体，对糖尿病的监控具有重要意义。
1.8同工酶的分离
应用CE技术对多种同工酶进行了成功的分离。其方法是先使用CE法分离样品形成同工酶区带后，切断电源，并加入含底物的缓冲液，酶催化底物显色，进一步形成可被检测区带，又接通电源，再次电泳，使被检测的同工酶染色区带先后通过检测器，测定较大吸收峰值即测定和分析被分离的同工酶。如检测淀粉酶P(胰)和S(唾液)型等，均可采用HPCE技术分离其同工酶。
1.9免疫复合物分析
CE可将免疫复合物从结合的抗原抗体中迅速分离出来，应用荧光标记单克隆抗体，经LIF-CE检测，检测限可达毫克级，可用于混合液体中低浓度的免疫复合物鉴定。
1.10DN段和染色体分析
CE分离DNA分子需多聚物交联剂如聚丙烯酰胺、聚乙二醇、甲基纤维素等材料添加到缓冲液中作为分子筛，可对相差一个甚至几个碱基DNA高效分离。有作者［22］应用CE做X连锁隐性遗传病研究，成功地对DNA限制片段进行了基因多态性分析。研究表明CE可用于分析拾携带者及胎儿产前诊断。
1.11在治疗药物监测中的应用
CE可简便快速分析生物样品中各种有形的药物成分。在药理学研究、法医学检查及临床毒理等方面也有广泛应用［23］。在糖尿病的治疗监测中，可检测血中格列本脲的浓度以防止药物使用不当导致低血糖。
1.12其他小分子/离子的检测
CE能在3～4min分离血和尿样品中的血管造影剂含量、草酸盐等弱阴离子，检测尿样中十几种卟啉物质和维生素C异构体。在新生儿遗传性有机酸尿症筛查用CE可检测到时多种有机酸标志物。
2展望
随着CE技术在临床检验医学方面的广泛应用，也必将带来更多的挑战，未来的CE技术在细胞和组织等复杂生物样品体系中的临床检验分析将成为主要的的发展趋势。生物样品分析必然要求进一步发展复杂样品前处理富集技术和更灵敏的检测技术。电泳方法的创新性研究主要体现在新分离模式的建立和电泳技术的联用上，例如微乳液毛细管电动色谱(MEEKC)、亲和毛细管电泳(ACE)和芯片毛细管电泳等;还有将分子信标技术与CE技术相结合进行可变长度寡聚核苷酸识别和基因检测［24］;探索利用CE对PCR产物作DNA单链构象多态性分析筛查点突变等。近年来我国在电泳技术的临床应用上有了迅猛发展，尤其是阵列毛细管电泳仪已经问世，这将克服目前大多数商品化毛细管电泳仪只能进行单根毛细管电泳的缺陷，这种高通量的新方法将会给后基因组时代的基因分析带来革命性的变化。CE技术作为一种重要的分析手段，随着它的快速发展，必将在临床检验医学方面有着更广泛的应用前景并在各种分析分离领域发挥巨大的发展潜力。
作者：阮丽明周艳洁朱茂灵单位：广西南宁市人口和计划生育服务中心
浅谈各科学在临床医学的作用:临床医学的病理学教学作用
1临床病例讨论教学形式有助于培养学生临床思维能力
临床病理讨论就是临床和病理共同对临床死亡病例的尸检结果与生前诊断及治疗过程进行对比分析，以汲取经验教训，既是诊断病理学的延伸，也是临床医生与病理医生密切联系，加强协作的有效途径。在病理教学中引入临床病理讨论是提高教学质量和医学整体教育质量的一个好方法。临床病例讨论可在实验室以小班为单位分组开展，精选2-3个典型病例,引导同学应用现有的知识从病因、发病机制、临床表现等方面展开讨论,并回答相关问题，其他组同学提出疑问或补充,老师解答疑难并归纳总结。临床病理讨论增强基础理论与临床实践相结合，不仅是对授课内容的回顾,更重要的是教会学生病例分析的基本思路和方法,使学生能够对自己所学的知识进行纵向和横向联系,理解各病理过程之间的相互联系,做到把整本教材的内容融会贯通起来,逐渐形成正确的临床思维过程。这种学生和教师之间的互动式教学形式,激发了学生的学习兴趣和学习积极性,促使他们认真读书、独立思考、查阅资料、相互讨论，有助于培养学生的临床思维能力。
2体验尸体解剖和临床外检工作有助于学生更好掌握病理知识
病理学很重视疾病的形态学变化，而很多疾病的病理变化的获得来自细致的观察和实践。学生看到的病理教学标本都是经过福尔马林固定，其大小、颜色、硬度与新鲜标本有所不同，教学切片也是经过多道程序事先制好的，病变区域的形状、大小可因切面而不同。为使学生能正确且熟练地辨认病变的标本、病理切片,应尽可能的让学生有机会接触临床病理工作。一般医学院校都有相应的附属医院，病理学老师都是身兼教学和临床外检工作，因此有条件让学生参与尸体解剖工作和临床外检工作，让学生亲生体验一下新鲜的人体病理标本是怎样的，和实验室看到的经固定液固定的标本有什么区别，还可以了解病理切片是怎样来的，从而对课堂上所学的内容有更深刻的体会，使学生以后在实验中观察病变标本时能较快、正确地描述病理变化，同时了解病理的工作和流程，日后从事临床工作后更便于沟通。
3注重教师的素质培养是充分发挥教学桥梁作用的保障
要充分发挥病理学的桥梁作用，首先要求教师应具备除病理学知识之外的各种基础和临床知识，包括组织胚胎学、人体解剖学、病理生理学、内科学、外科学等,并能融汇贯通灵活应用于教学，努力做一个“全能型”教师，这是充分发挥教学桥梁作用的保障。教师只有通过不断拓宽自身的知识面,不断的学习,提高自身的综合素质,力求做到“精通病理学,通晓全科医学”，才能为训练学生由基础医学向临床医学学习转化创造充分的必要的条件。病理学是医学的主干课程之一,是连接基础医学与临床医学的一门基础课程。通过学习,除了要教会学生疾病的病理改变，更要联系临床知识，打破了基础与临床的界限和学科的界限，让学生更深刻掌握课堂知识，培养学生临床思维能力,为后续学习临床专业课、参加临床实践和进行疾病的防治奠定基础，从而能更充分发挥病理课的桥梁作用，为学生完成向临床医师的角色转化做好充分准备。
作者：周新华 赵彤 申洪 丁彦青 单位：南方医科大学基础医学院病理学系
临床医学的病理学教学作用
1临床病例讨论教学形式有助于培养学生临床思维能力
临床病理讨论就是临床和病理共同对临床死亡病例的尸检结果与生前诊断及治疗过程进行对比分析,以汲取经验教训,既是诊断病理学的延伸,也是临床医生与病理医生密切联系,加强协作的有效途径。在病理教学中引入临床病理讨论是提高教学质量和医学整体教育质量的一个好方法。临床病例讨论可在实验室以小班为单位分组开展,精选2-3个典型病例,引导同学应用现有的知识从病因、发病机制、临床表现等方面展开讨论,并回答相关问题,其他组同学提出疑问或补充,老师解答疑难并归纳总结。临床病理讨论增强基础理论与临床实践相结合,不仅是对授课内容的回顾,更重要的是教会学生病例分析的基本思路和方法,使学生能够对自己所学的知识进行纵向和横向联系,理解各病理过程之间的相互联系,做到把整本教材的内容融会贯通起来,逐渐形成正确的临床思维过程。这种学生和教师之间的互动式教学形式,激发了学生的学习兴趣和学习积极性,促使他们认真读书、独立思考、查阅资料、相互讨论,有助于培养学生的临床思维能力。
2体验尸体解剖和临床外检工作有助于学生更好掌握病理知识
病理学很重视疾病的形态学变化,而很多疾病的病理变化的获得来自细致的观察和实践。学生看到的病理教学标本都是经过福尔马林固定,其大小、颜色、硬度与新鲜标本有所不同,教学切片也是经过多道程序事先制好的,病变区域的形状、大小可因切面而不同。为使学生能正确且熟练地辨认病变的标本、病理切片,应尽可能的让学生有机会接触临床病理工作。一般医学院校都有相应的附属医院,病理学老师都是身兼教学和临床外检工作,因此有条件让学生参与尸体解剖工作和临床外检工作,让学生亲生体验一下新鲜的人体病理标本是怎样的,和实验室看到的经固定液固定的标本有什么区别,还可以了解病理切片是怎样来的,从而对课堂上所学的内容有更深刻的体会,使学生以后在实验中观察病变标本时能较快、正确地描述病理变化,同时了解病理的工作和流程,日后从事临床工作后更便于沟通。
3注重教师的素质培养是充分发挥教学桥梁作用的保障
要充分发挥病理学的桥梁作用,首先要求教师应具备除病理学知识之外的各种基础和临床知识,包括组织胚胎学、人体解剖学、病理生理学、内科学、外科学等,并能融汇贯通灵活应用于教学,努力做一个“全能型”教师,这是充分发挥教学桥梁作用的保障。教师只有通过不断拓宽自身的知识面,不断的学习,提高自身的综合素质,力求做到“精通病理学,通晓全科医学”,才能为训练学生由基础医学向临床医学学习转化创造充分的必要的条件。病理学是医学的主干课程之一,是连接基础医学与临床医学的一门基础课程。通过学习,除了要教会学生疾病的病理改变,更要联系临床知识,打破了基础与临床的界限和学科的界限,让学生更深刻掌握课堂知识,培养学生临床思维能力,为后续学习临床专业课、参加临床实践和进行疾病的防治奠定基础,从而能更充分发挥病理课的桥梁作用,为学生完成向临床医师的角色转化做好充分准备。
浅谈各科学在临床医学的作用:论电泳技术在临床医学的作用
1CE在临床检验医学的应用
1.1血清蛋白质分析
血清蛋白电泳通常是临床上在无论何种原因引起的血液沉降率增加时都需要进行的常规实验检测项目,它将有助于确诊临床报告的炎症或感染的状况及提示进一步检测其他项目。采用CE可分离血清蛋白,并能计算各蛋白质的相对浓度,避免了凝胶电泳法染色、脱色过程中多种影响因素造成的误差,CE法的结果重复性好,可信度高[11]。前清蛋白在血清中的浓度可表明营养状态,且是确定恶性肿瘤、炎症、肝硬化、霍奇金病的重要指标,多数电泳法难以分辨,而用CE法很容易分离定量,检测波长为214或200nm。CE不仅增加了清蛋白部分的分辩率,对双清蛋白血症检测的灵敏度也有了很大的提高。CE提供了足够的在α1区的分辩率以区分α1酸性糖蛋白与α1抗胰蛋白酶。在α2区的球蛋白区,α2巨球蛋白与触球蛋白不易区分,但在β-球蛋白区具有高分辩率[12]。CE法对肾病、慢性感染、自身免疫病和肝硬化等多种疾病的免疫球蛋白分析有较好的优势。
1.2单克隆免疫球蛋白的特征鉴别
单克隆免疫球蛋白是一种过度合成的单一类型或亚型的异常免疫球蛋白。它的产生是由于单一克隆的恶性或高致敏B细胞的无限增殖,从而产生同源性的单克隆免疫球蛋白。单克隆免疫球蛋白组分的检测运用了各种与免疫学、血液学和生物化学等领域相关的技术和仪器。通过用特异性抗体包被的琼脂糖凝胶球消除一个特殊的峰来指示是哪种单克隆成分,借此对免疫球蛋白的型、亚型和轻链型予以鉴定和分类[13]。这一技术提高了对该蛋白组分的分析与研究水平。
1.3血红蛋白成分的分析
在地贫高发区检测出地贫高风险夫妇和预防地贫患儿出生是关系到提高我国出生人口素质和实现优生优育工作的一个重要任务。其中血红蛋白(Hb)电泳是研究和分离异常血红蛋白的有效方法,亦是诊断血红蛋白分子病和地贫不可缺少的手段之一[15]。毛细管电泳法是在充满电泳液的石英毛细管中进行电泳的技术,在溶血试剂中进行稀释的红细胞样品,会被注射到毛细管的负极端,在高压电的作用下竞相电泳分离,然后Hb会被靠近正极端的415nm光波检测装置检测到[16]。通过毛细管电泳将蛋白质分离,采用波长为200nm氘光源和CCD探测器,对血红蛋白成分分析灵敏度和分辨率高[17]。CE是一种敏感度和度较高的分析方法,具有操作简便、检测时间短的优点[18]。通过使用碱性pH缓冲液,正常和异常(或变异体)血红蛋白按下列顺序检测出来,从阴极到阳极依次为:δA'2(A2变异体),C,A2/O-阿拉伯血红蛋白(O-Arab),E,S,D,G费城血红蛋白(G-Philadelphia),F,A,Hope,Bart,J,N-巴尔的摩血红蛋白(N-Baltimore)和H。在CE区带中不出现碳酸酐酶,不但可以鉴别出HbA2变异体,还能够检测HbA、HbF、HbA2含量以及其他异常血红蛋白,可用于诊断地中海贫血及其他血红蛋白病[19]。
1.4尿蛋白质分析
临床医生和生物学家关注的尿蛋白检查的概念正在逐步更新。蛋白尿的分析得益于近年来重要的方法学的进步,特别是根据分子量和所带电荷来分离蛋白质的电泳技术。当今的生物学技术主要应用电泳方法来检测游离轻链,并用免疫学技术来分析它们的特性。免疫游离轻链是肾脏损害的直接原因,最常见的是肾小管性或系统性。这一毒性的出现可以是在尿中显现沉淀,也可以在间质中沉积。在过去的几年里,有关免疫球蛋白轻链毒性因素方面的认识已有了很大的进展。电泳异常条带位于β或γ区的病例中有三分之二的情况存在本周氏蛋白。一条或多个条带是根据尿液中单克隆免疫球蛋白存在与否进行识别,并且与典型的肾损伤或肾功能不全相关[20]。游离轻链常常沉积在肾小管中,导致肾小管中毒。由于蛋白尿定量与肾脏损害相关,形成蛋白尿的特定蛋白性质就反映了肾单位病变所在的位置和肾功能异常的发病机理。尿中特定蛋白的分析可以认为是如同一个真正的生化活检,它可即刻提供肾单位内部的状况[21]。
1.5肌红蛋白分析
肌红蛋白异常增高常在急性心梗后患者的血液和尿液中出现,而免疫比浊法难以测定低浓度的肌红蛋白。但是,CE可在8min内快速分离尿中低浓度肌红蛋白并与血红蛋白相鉴别。
1.6脂蛋白分析
CE可将血浆脂蛋白分离出14个亚组分,如在分离缓冲液中加入表面活性剂,可在短时间内对2个主要组分:高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)进行定量,对LDL进一步分离为3个亚组分:LDL、中密度脂蛋白(IDL)和极低密度脂蛋白(VLDL),并对各组分的比例进行推算,从而对脂蛋白异常提供不同脂肪代谢的信息。
1.7糖化血红蛋白(HbA1c)分析
血红细胞中的血红蛋白糖基化部分即为糖化血红蛋白(HbA1c)。HbA1c的水平与测定前数周内的血糖水平呈正线性相关,因此对糖尿病患者测定糖化血红蛋白可了解过去一段较长时间内的血糖水平。此测定并不能作为糖尿病的诊断,但可用于作为控制血糖的指标,糖化血红蛋白的量还可作为评价各种治疗措施效果的标准。应用CE进行HbA1c电泳能分离几种糖蛋白的糖基构型,可鉴别糖化血红蛋白A1、A1c和其他异构体,对糖尿病的监控具有重要意义。
1.8同工酶的分离
应用CE技术对多种同工酶进行了成功的分离。其方法是先使用CE法分离样品形成同工酶区带后,切断电源,并加入含底物的缓冲液,酶催化底物显色,进一步形成可被检测区带,又接通电源,再次电泳,使被检测的同工酶染色区带先后通过检测器,测定较大吸收峰值即测定和分析被分离的同工酶。如检测淀粉酶P(胰)和S(唾液)型等,均可采用HPCE技术分离其同工酶。
1.9免疫复合物分析
CE可将免疫复合物从结合的抗原抗体中迅速分离出来,应用荧光标记单克隆抗体,经LIF-CE检测,检测限可达毫克级,可用于混合液体中低浓度的免疫复合物鉴定。
1.10DN段和染色体分析
CE分离DNA分子需多聚物交联剂如聚丙烯酰胺、聚乙二醇、甲基纤维素等材料添加到缓冲液中作为分子筛,可对相差一个甚至几个碱基DNA高效分离。有作者[22]应用CE做X连锁隐性遗传病研究,成功地对DNA限制片段进行了基因多态性分析。研究表明CE可用于分析拾携带者及胎儿产前诊断。
1.11在治疗药物监测中的应用
CE可简便快速分析生物样品中各种有形的药物成分。在药理学研究、法医学检查及临床毒理等方面也有广泛应用[23]。在糖尿病的治疗监测中,可检测血中格列本脲的浓度以防止药物使用不当导致低血糖。
1.12其他小分子/离子的检测
CE能在3~4min分离血和尿样品中的血管造影剂含量、草酸盐等弱阴离子,检测尿样中十几种卟啉物质和维生素C异构体。在新生儿遗传性有机酸尿症筛查用CE可检测到时多种有机酸标志物。
2展望
随着CE技术在临床检验医学方面的广泛应用,也必将带来更多的挑战,未来的CE技术在细胞和组织等复杂生物样品体系中的临床检验分析将成为主要的的发展趋势。生物样品分析必然要求进一步发展复杂样品前处理富集技术和更灵敏的检测技术。电泳方法的创新性研究主要体现在 新分离模式的建立和电泳技术的联用上,例如微乳液毛细管电动色谱(MEEKC)、亲和毛细管电泳(ACE)和芯片毛细管电泳等;还有将分子信标技术与CE技术相结合进行可变长度寡聚核苷酸识别和基因检测[24];探索利用CE对PCR产物作DNA单链构象多态性分析筛查点突变等。近年来我国在电泳技术的临床应用上有了迅猛发展,尤其是阵列毛细管电泳仪已经问世,这将克服目前大多数商品化毛细管电泳仪只能进行单根毛细管电泳的缺陷,这种高通量的新方法将会给后基因组时代的基因分析带来革命性的变化。CE技术作为一种重要的分析手段,随着它的快速发展,必将在临床检验医学方面有着更广泛的应用前景并在各种分析分离领域发挥巨大的发展潜力。
