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天然产物化学论文实用13篇

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天然产物化学论文

篇1

植物化学是应用现代化学理论和方法研究植物中的化学成分的一门学科。其研究内容包括植物成分(主要是具有生理活性的次生代谢产物)的提取、分离纯化、结构鉴定、理化性质以及主要结构类型化合物的生物合成途径和生物转化等。植物化学是植物学与有机化学相结合而形成的一门交叉学科,是天然有机化学或天然产物化学的重要组成部分,是在分子水平上揭示植物奥秘的学科,也是植物资源合理利用的基础。植物成分不仅是天然药物的重要组成部分,是发现新药或药物活性先导化合物的重要来源,而且还广泛应用于农业、工业、日用化工、食品、染料和化妆品等行业。我国对植物资源的利用有着悠久的历史和传统,涉及社会生活的方方面面。化学专业的学生毕业后许多会从事与植物成分有关的深造学习、技术、管理和服务工作。学生在本科学习阶段进行植物化学基本知识和实验操作技能的学习,对将来的深入学习和工作无疑具有重要的意义。鉴于这种情况,结合云南丰富的植物资源和地域特点,为了让学生尽早了解社会的发展和需求,拓宽知识面,改善知识结构,更好地融入社会,投身经济建设主战场,围绕国家“西部大开发”和云南建设“绿色经济强省”的战略目标,我们于1996年开始为化学专业高年级学生开设“植物化学”课。现根据十多年来的教学工作,谈谈教学中的几点体会。

一、课程定位与目标

根据《国家中长期教育改革和发展规划纲要》,培养造就适应我国经济社会发展需要的高质量多样化人才成为新形势下我国高等教育教学改革的重点。植物化学课程以“培养厚基础、高素质、强能力的复合型人才”为人才培养的基本目标。由于我校的学生多数来自云南,结合云南的资源特点、社会、经济发展的实际,课程定位于培养的学生具有宽广的化学基础知识,不仅可以胜任传统的中学化学教学,而且能够根据自身情况和当地社会经济发展的需要,进行与植物成分相关的研究工作和产品开发,或者为进一步的深造提高打下坚实的基础。植物化学的课程目标是让学生认识植物化学的应用领域,了解植物化学研究的内容、目的、意义、发展现状和趋势;了解植物化学成分研究的程序及纯化合物的结构鉴定方法;了解各类重要植物化学成分的生物活性及应用;掌握植物化学成分常用的提取、分离方法,理解提取分离的原理;掌握各类重要植物化学成分如:糖、苷、萜、甾体、生物碱、芳香族化合物(香豆素、木脂素、黄酮)等的化学结构特征、性质和提取分离的方法。为继续学习以及毕业后从事与植物成分相关的工作打下理论和实践基础。通过植物化学实验,锻炼学生在植物化学领域的实验操作技能,通过实验加强理解理论知识,培养学生理论联系实际和解决实际问题的能力。进一步要求通过植物化学课程的学习,让学生感觉学到的知识就在自己的身边。通过开放实验、大学生课外科技活动、毕业论文设计等,锻炼学生的创新思维、动手能力;培养学生从提出问题,到分析问题和解决问题的能力;强调合作学习,包括师生之间的合作、同学之间的合作,培养学生严谨求实的科学态度、团结互助的团队合作精神;培养学生适应现代知识体系发展的综合能力。

二、教学内容设置

与其他化学专业课相比,植物化学课在化学专业中开设较少,无专门的教材。国外有的院校为学生开设“天然产物化学”,课时不多,无专门的教材;国内药学专业、中药专业等有“天然药物化学”、“中药化学”等教材。植物化学只有农林院校主编的两本教材,侧重于农林专业。为了编写适合化学专业使用的植物化学教材,我们于1998年编撰印刷“植物化学”讲义,在教学中使用。2004年,我们组织云南高校植物化学研究领域的科技人员,又是奋斗在教学一线的教师一起编写了《植物化学成分》一书,由化学工业出版社出版。该书内容既包括了植物化学成分的基本知识,又兼顾学科最新进展。尤其具有中国(包括云南)天然产物的特色,与社会的需求和发展紧密,便于学生把握植物化学的研究趋势和发展脉搏。《植物化学》课程由四大知识模块构成。第一部分,植物化学概论。包括植物化学的研究内容、意义、目的、研究程序、研究形势和发展趋势;植物化学成分提取、分离、结构鉴定的方法。第二部分,各类常见植物成分的结构特征、理化性质、提取分离、纯化精制以及结构鉴定的基本方法。第三部分,自主学习。每名同学就自己家乡特色的药用植物1~2种,对其活性成分的提取、分离方法及在医药、保健品、染料、色素和化妆品等领域的应用通过查资料后,写成小论文进行讨论。第四部分,植物化学实验。培养学生植物化学领域的实验操作技能,通过实验加强理解理论知识,培养学生理论联系实际和解决实际问题的能力。部分同学通过进一步的开放实验、大学生课外科技活动、毕业论文设计等,锻炼创新思维和动手能力。理论课授课共54学时,植物化学实验共36学时。

三、教学方法

采用课堂讲授、课堂讨论、实验、课外互动及学生课外查阅资料、阅读、归纳总结、报告、课外科技活动等方法进行教学。

1.课堂讲授。课堂讲授中注重经典内容和学科发展的有机结合;注重热点植物化学成分和云南特色药用植物的有机结合。采用多媒体授课,既有效地利用了课时,使学生在单位时间内获得较大的知识量,又能将植物图片、复杂的植物成分结构等一些比较抽象的内容形象化、具体化,生动地表现出来,加深学生的理解。将植物化学课件上网或打印出来提供给学生,使学生能够课前预习,课堂上能够跟得上教师的思路。通过课堂讲授,使学生系统地获得了各类植物化学成分的结构特征、主要理化性质、提取、分离方法、生物活性等知识。

2.课堂讨论。通过课堂讨论培养学生对植物化学基本理论和基本知识的归纳总结及综合应用的能力。启发学生从应用的角度综合地去掌握植物化学知识。如生物碱的提取,根据所学生物碱的结构特征、理化性质,让学生归纳其提取分离有哪些方法等。学生发言踊跃,对各种不同的提取方法提出自己的见解和质疑。

3.课外互动。课程教学中要求每个学生就自己熟悉的药用植物1~2种,自己出题,在课外进行资料查阅、归纳总结、小论文写作和幻灯片制作。这个过程,增加了学生与老师的互动和同学之间的交流讨论。弥补了植物化学内容多、课时少、辅导答疑时间有限的缺陷,也有利于学生释放自我,激发潜能,培养综合能力。学生将自己的课后阅读资料做成PPT进行汇报,一方面引导学生“走出书本”,扩大学生的知识面,锻炼了其查阅文献、分析和解决问题的能力;另一方面,提高了其专业交流的水平。

4.科研反哺教学。教学中,紧密结合云南特色药用植物成分或课程组教师的科研工作进行案例探讨,让学生觉得所学知识联系实际,有用,加深学生对所学知识的理解。如在结构鉴定、黄酮、二苯乙烯、环烯醚萜、二萜、三萜等内容的教学中,结合课程组教师的工作进行讲解,深受同学欢迎。既让学生对自己老师的工作有所了解,又收到了良好的教学效果。

为了培养学生的实际动手能力以及发现问题、分析问题和解决问题的能力,安排了6~10个植物化学实验,培养学生对常见植物化学成分提取、分离、鉴定的实际操作能力。为进一步加强对学生创新能力、实践能力、思维能力的培养,充分利用课程组教师科研课题较多、科研能力较强、科研方向与云南省地方经济发展紧密结合的特点,鼓励学生根据自己的兴趣,参加教师的科研活动,或在教师的实验室进行毕业论文实验,或自主申请省、校课外科技活动资助进行探索学习,以激发学生的学习兴趣,实现科研反哺教学。每年均有二十多名同学参与植物化学课程组老师的科研项目研究,在老师的指导下进行课外科技活动。

四、教学效果

植物化学课程由于贴近生活,与社会、经济发展密切相关,深受学生喜爱。学生的学习兴趣和主观能动性大大增强,资料查阅、综合分析、实验操作、论文或报告写作、科学思维等能力有很大的提高。自主申请学校的大学生课外科研基金,或参与老师的科研项目进行研究的热情高涨。相当一部分学生考取植物化学方向的硕士研究生进一步深造,作为人生的进一步追求。一些同学通过自主学习或参加课外科技活动,发表了学术论文,一些同学的课外科技作品获得了全国大学生“挑战杯”课外学术科技作品竞赛三等奖等奖励。

参考文献:

[1]徐任生.天然产物化学[M].第二版.北京:科学出版社,2004:1-2.

[2]Baker DD,Chu M,Oza U et al.Nat. Prod. Rep.2007,24,1225–1244.

[3]Filho RB.Quim.[J].Nova,2010,33(1):229-239.

篇2

1天然产物化学课程创新能力培养的流程设计

1.1基础练习

天然产物化学是一门理论和实践并重的课程,良好的理论基础是其实践操作的前提,而实践操作又丰富了理论知识体系,但最终落脚点是在实践应用上,一些基础的实践操作技能单靠理论是无法习得的,要熟练掌握还是需通过实验课程的习得和课后不断练习,并且对基本操作技能的熟练使用是实践创新的基础。尽管对天然产物进行深入研究的过程中会涉及非常多的实验操作方法,但其中最基本的操作方法和技能并不多,如天然产物提取,天然产物除杂、纯化,天然产物结构和理化性质的分析等,所涉及到的仪器设备或工具主要有提取装置、旋转蒸发仪、分层过滤装置、硅胶等不同类型柱色谱装置、薄层色谱、液相色谱装置、紫外检测装置等,都是初级简单的基础装置。因此,在实验教学过程培养学生创新能力的基础,是通过设计一些初级基本的课程,由浅入深,训练学生初步了解或掌握最基本的操作技能,使用最基础的装置和工具,如“黄连中小檗碱的提取与鉴定”、“黄芪多糖的提取分离和鉴定”等。这些基础实验作为天然产物化学研究的入门,必不可少,但是切勿过多,否则会因为重复类似的操作而使学生渐渐失去兴趣,阻碍了其创新发挥。

1.2自主选材

经过少而精的基础练习后,同学们对于天然产物化学的实践有了一定基础,为培养其创新能力,需激发学生的兴趣,要启发学生通过探索身边的未知,在实践中打开另一个世界的大门,并伴随带来的一定成就感,再进一步激发兴趣。此时,要求学生根据自身生活环境,选一种或多种材料,可以是植物、动物或微生物,然后根据兴趣方向进行组队。同学们自发组队完成后,为了保障后续创新训练的顺利开展,指导老师可根据实验课程基础练习阶段的表现情况,对各分组进行调整,并选定小组组长,同时根据自身经验从学生选出的材料中排除一部分收集或探索难度较大、明显超过学生水平的材料,并给出建议首选材料。

1.3自主设计

选材组队完成以后,便进入实验方案自主设计阶段,要求学生结合之前实验课程的实验设计,自主查阅文献并设计实验方案。为了节约时间,提高效率,可要求小组不同学生根据自身特长进行分工,如资料收集、整理,具体某一实验流程的安排设计、调研确定实验中所需仪器设备实验室是否满足并拟定解决方法,及最后的设计报告的撰写等。本过程是理论探索过程,为保障设计的合理性和完整性,指导老师需对设计报告进行审核和修改,并及时为学生解疑答惑,提出意见,同时鼓励学生克服困难,避免部分学生放弃。还应就实验设计中涉及的实验室安全问题进行教育培训,提前识别风险,预估风险并提出方案规避风险,确保实验进行中的安全问题,提高安全意识。

1.4实验方案实施

实验方案设计完成后,便进入实践实施阶段,该阶段可能是天然产物化学实验中最具挑战的部分,其周期最长,遇到的问题可能最多。此阶段,指导老师须定时与学生分析和讨论实验过程中的问题、现象等,指导学生如何获取解决方法,还须在实验实施过程中强调实验安全操作流程,培养学生安全意识。此外,指导老师要鼓励学生仔细观察、不断重复,自主发现问题;也要对实验过程中的新现象,引导学生思考,鼓励大胆假设;对部分初步判断特别有价值或有意义的新问题,指导老师甚至可以和学生一起进行探究。整个过程中要培养学生做好实验记录的习惯。

1.5实验结果整理

实验完成后,要求学生对实验结果进行整理,并撰写报告,对部分有科学价值的内容,鼓励学生撰写成论文,投稿发表。对于实验结果的整理分析,可以帮助学生认识实验中得到了怎样的数据,说明了什么问题。通过对整个实验的回忆,能让学生意识到自身的进步,从而增加其探索的欲望。其中,对具有科学价值的创新成果,投稿到期刊,对学生来说也是一种认可,会大大激发学生的成就感,在投稿返修过程中还能培养学生抗挫折能力和科学韧性。

2课程创新设计实施的保障

2.1师资力量的保障

本文设计提出的天然产物化学实验课程中培养学生创新能力的流程的第一阶段基础训练阶段,由于其整个实验设计、实验过程和实验结果等早已明确,实验为验证性工作,一般实验教师便可胜任。而在此基础上开展的后续流程,具有明显的探索性,期间所遇到的问题,和所面临的困得更多,需具有较好科研基础和创新能力的老师作为指导,这对后续流程的顺利开展和完成具有重要作用。并且,由于每位老师精力有限,指导的小组不宜太多,为每一个小组配备专门指导老师很重要。因此,在天然产物化学实验课程开始前,教研室相关课程负责教师要为学生遴选一个导师库,根据教师研究方向匹配相应实验小组;也可以由学生根据实验设计和研究内容,在导师库选择合适的指导教师。目前,尽管随着各大高校不断引进高水平博士,高校的师资水平在不断提高,但国内高校很少有这种直接为某一个实验创新课程匹配师资的举措。不过,从目前很多高校开展的大学生创新创业项目来看,高校中已经有相当部分教师有意愿指导学生作探索研究[6],并且随着具有博士学位教师的增加,此类教师队伍人数在逐年增加,可见高校中愿意带领学生开拓创新的老师并不少,这为本文提出的在天然产物化学实验课程中培养学生创新能力的流程的顺利开展提供了一定保障,为建立相应的导师库提供了可能。

2.2时间和场地的保障

由于天然产物化学课程中涉及实验的开展需要耗费大量的时间和精力,并且需要较固定的场所,因此,在时间和场地方面的保障必不可少。每一门课的课时量有限,除了减少验证性实验课的课时量外,增加实验课的总课时量也很重要,同时,还需要学生拿出部分课余时间。由于不同学生课余时间的安排不尽相同,小组间不同成员的合理分工就非常有必要,通过合作从而保障创新性实验的顺利进行。此外,随着开放性实验室越来越多,公共平台也越来越多,获取一个相对固定的地方也相对容易,这为创新性实验课程的顺利开展提供了有力支撑。

2.3经费保障

材料的收集、试剂和耗材的购买都需要经费,充足的经费来源是保障其顺利实施的前提之一。教研室在安排相关实验前,便需要预算相应的经费需求。此外,对于创新性较好的实验,可以在完成课程教学的同时,申请高校相应支撑项目,如大学生创新创业项目。此外,部分选题在筛选指导老师时,如果能找到具有类似科研项目的指导教师最好,这样指导老师可以从自己的科研经费中拿出一部分资金,保障创新实验的顺利完成。此外,不同高校还可以从不同的创新实验课程中筛选出部分具有较好价值的研究进行资助。

2.4过程监督

篇3

天然药物化学(Natural medicine chemistry) 重点讲授天然药物中化学成分的结构类型、理化性质、提取分离和结构鉴定的基本知识,药学专业主要培养具备药学学科基本理论、基本知识和基本技能能够从事药物及其制剂的研究和开发、药物制剂的生产和质量管理、临床药学、药物分析、医药营销等方面工作的高级科学技术人才[1,2]。为了使学生更好地掌握这门课程,达到培养目标所要求的知识水平,要求教师必须更新教育观念,改进教学方法和教学思路,在保证传统理论体系不变的情况下,尽可能地加大教学信息量,提高天然药物化学的教学质量。我们在几年的教学实践中,采用了以下几种教学方法,收到了较好的教学效果。

1注重理论课教学方法的改进

1.1紧扣重点、难点:天然药物化学涉及到有机化学、波谱解析、生药学等方面的课程内容,学生学起来有一定的难度,容易产生抵触情绪。因此,在教学过程中,一定要做到主次分明,抓住教学的重点、难点,紧密围绕教学大纲总论部分。总论主要介绍化学成分提取、分离、鉴别和化合物结构测定的一般原理,而后面的各章节主要讲解各类天然化学成分的结构性质,提取、分离、鉴别和结构测定的内容。首先, 在课程学习的开始,抓住学生的兴趣,循序渐进式教学是关键。在天然药物化学总论部分,应该结合天然药物的发展历史和著名的天然产物开发成的上市新药实例来讲解这门课程的学习目标和内容,让学生了解到:天然药物就在身边,天然药物化学是把天然产物开发成新药的桥梁。对现有教学内容进行合理取舍后,对我国科学家在天然产物方面的研究及贡献、对我国学者近年发表的高水平学术文章都适当地做了一些介绍,授课时还重点介绍一些著名天然药物如青蒿素、喜树碱、紫杉醇等的开发过程。使学生充分认识天然药物化学在药学中的重要地位,激发学生学习的主动性和积极性。

1.2启发式教学,自我学习:古希腊教育家亚里士多德说:“思维自惊奇和疑问开始。”启发式教学法是指学生在老师“启”的引导下自觉积极地要求学习并获取知识的一种教学方法。我们在课堂上常用一问一答的方式,通过有趣的事例、具体的实验、科学的数据使学生首先对所学内容产生浓厚的兴趣。例如,藏红花为什么在花的初期不红而越开越红呢?又如关于鞣质中这个“鞣”字的写法,即皮革的柔软,可以说明皮革中的成分,又如在讲解皂苷新课时,先提问常用中药人参有什么生物活性,接着问人参为什么有这样的生物活性,里面究竟有什么成分呢?这些问题都出自学生身边,他们熟知的现象,更想知道原理。这样抓住了学生好奇的心,促使他们深入思考,激发他们探索问题、主动学习的热情。

1.3注重教与学的交流:天然药物化学的一个难点在于对已学课程的综合应用。这就要求教师在教学的同时必须注重与学生的交流,全面掌握学生的学习情况。如波谱学知识在天然药物结构解析中的应用,涉及到分析化学、有机化学、波谱分析等多门课程的内容,学生较难理解和掌握。我们从有机立体化学基本理论开始引入,充分调动学生的立体空间想象力,使学生对复杂的有机化合物立体结构不再感到难以理解与想象,在讲授三萜化合物、甾体化合物中效果很好。很多教师看来非常简单的概念如色谱,学生可能感到抽象。因此对于增加概念的掌握和理解具有重要的作用通过运用多媒体技术,可将实验流程生动地表现出来,使学生获得丰富的感性材料。例如在学孔吸附树脂和凝胶色谱法时,我们做了吸附柱和分子筛的动画进行演示,将其原理生动形象地展现出来,使学生有一个直观的印象。

2强化实验教学方法的改进

2.1不断调整实验内容,提高实验讲义水平:天然药物化学是一门实验性很强的学科,实验教学任务是以验证方式强化理论教学内容,以综合或设计方式培养学生提取、分离及鉴定天然药物中有效成分能力。还有很多学生仅观察现象而不善于深究其中蕴含的原理,如过滤时不知目标成分在沉淀里还是滤液中,分离萃取时不知成分在上层还是下层等。我们适度增加实验时数,实验项目类型相互交叉渗透。提高学生分析、解决问题能力。比如在验证型实验中安排的是一些重要类型化合物的定性鉴别,要求学生利用不同类型化合物的特有化学性质,通过正确的操作,区别不同类型化合物,目的在于使学生掌握各种类型化合物定性鉴别的方法。重新编写实验讲义,引人创新性实验,减少了验证型实验,增加了应用性强的综合型实验[3]。比如超声波辅助提取法和微波辅助萃取法所需设备简单,使用范围广、效率高、污染小,可适当引入实验教学,既可以减少药材、试剂用量,又可缩短实验时间,有助于增强实验教学效果。

2.2重视实验报告,增强实验科研含量: 在以往的天然药物化学实验教学中多采用单一验证式知识型模式。实验内容、步骤等在教材上都已列出,学生通过预习,实验时只要“照方抓药”就可完成实验。我们要求学生的实验报告以科技论文的格式书写,以锻炼学生的逻辑思维能力和分析、创造、表达、综合等各项能力,有意识的引导和培养学生撰写科技论文的基本素质实践表明这样的教学方式可以变消极被动为积极主动。实验老师在实验中首先准备大量的有关每步实验问答题和思考题,在实验中要求学生回答和解决,老师对每次提问情况做记录并把它纳入学生平时实验成绩。比如在芦丁的水解过程中,芦丁在酸水中并加热的条件下,烧瓶中变化是先混浊的,然后变成了澄清的溶液,溶液沸腾后一段时间,溶液的颜色有黄色变成了鲜黄色,我们要求学生利用所学知识解释所产生的现象和变化,学生在认真思考后得出芦丁和槲皮素的溶解度差异是该现象的本质原因;如果有的学生观察不认真,有的现象就看不到,更不用说解释了。

2.3开设设计性实验,培养学生自主实验能力:近几年来,我们在天然药物化学实验中尝试开设学生设计性实验。具体办法是:由教师集体命题并只给出实验题目,学生必须主动查阅文献,并加以归纳总结,制订切实可行的实验方案供教师审阅,选择可行性实验方法,并要求学生在实验报告中对自己所选的工艺路线及实验结果进行分析讨论。充分调动了学生学习积极性,体现了学生的主体地位,培养了学生创新能力和独立工作能力。为了增强学生的学习兴趣,调动其实验积极性,培养学生的创造性,我们将教师的科研实验引入到教学实验中去,给学生提供一个进行部分研究性实验的机会,从而学到更多实验技能,同时学生的实验结果也为教师的研究工作提供了资料。我们在实验教学中,增加了自主设计实验比例,将科研实验思维引入到教学实验中去,给学生提供一个进行部分研究性实验的机会。例如,我们将“天然药物化学成分系统预试验”的实验内容设计为“某药材的提取、初步分离及成分预试”。实验按照科研实验的常规方法进行,即先将药材粗粉用工业甲醇或工业丙酮提取,回收甲醇或丙酮,提取物以适量水溶解,分别以不同极性的有机溶剂(石油醚、醋酸乙酯、正丁醇等)萃取,再分别对各萃取部分进行薄层检查和定性反应,确定含有哪些种类的化学成分。通过这种训练,学生掌握了一般天然药物化学科研实验的前期处理方法,锻炼了操作技能,实验结果也很有意义。将科研带进课堂,锻炼了学生的操作技能了,提高了发现问题、解决问题的能力,也培养了学生良好的科研素质。

综上所述,培养学生的学习兴趣和启发学生参与教学活动的主动性是提高教学质量的重要途径,针对天然药物化学实验教学实践性强的学科特点,应提高学生对实验课的重视程度,使学生掌握天然药物化学实验的基本操作技术和方法,培养观察、分析、解决问题能力,达到学以致用目的,为将来运用实验手段进行科学研究打下坚实基础。

参考文献

篇4

天然药物化学是运用现代科学理论与方法研究天然药物中化学成分提取、分离、结构鉴定的一门实践性很强的学科。实验教学是其重要组成部分,它不仅能够验证和巩固课堂学习的理论知识,使学生掌握天然药物化学的基本操作技术和方法,还可以培养学生观察、分析、解决问题的能力,同时也是实现培养学生创新意识和能力的重要途径[1]。随着现代科学技术在天然药物化学领域中的广泛应用,传统的实验教学已经跟不上时代的步伐:①天然药物化学实验周期长,在有限的教学课时下,学生不可能完成更多的实验操作,这将造成学生在实验手段和知识结构上出现欠缺;②不同类型天然活性成分会采用不同的提取分离、结构鉴定方法,且现代提取分离、结构鉴定新技术层出不穷,一般本科实验室没有能力完成技术的更新,容易造成实验与科研及工业化生产脱节现象。多媒体技术具有直观性好、信息量大、交互性强等特点,将多媒体技术应用于天然药物化学实验教学对提高实验课堂教学的效率和效益都能够起到事半功倍的效果。本文结合我校制药工程专业天然药物化学实验教学现状,在多媒体辅助实验教学方面做了一些积极的探索。

1 采用多媒体能够生动形象地展示实验内容

天然药物化学实验课程中,因待提取有效成分结构的不同,决定了其性质、显色鉴别反应、提取分离工艺不同。传统实验教学过程中,教师要书写大量板书,对实验原理、步骤及注意事项要不厌其烦地讲解使学生听得枯燥无味,在实验过程中手忙脚乱,很难保证实验效果。利用多媒体技术,用图片方式展现待提取分离组分的结构、鉴别反应过程中的基团反应机制;采用动画方式再现提取分离工艺的原理及动态流程,同时用图像、声音等方式提醒提取分离过程中的注意点。通过这种方式将理论知识和实践操作有机地结合在一起,促进了学生由感性认识转化为理性认识的过程,增强了学生运用知识的能力。再如准备实验中的几十种玻璃仪器的清点和认知,传统实验教学需要教师讲解3~4小时,结果学生对仪器的认识还是一知半解;现在采用多媒体方法展示各种玻璃仪器正确的使用方法,使用后的洗涤保存方式以及错误使用后的后果,这种直观方式将学生的被动听讲转变为主动求知,显著提高了教学的速度和质量。同时,这种多媒体形式不限于课堂,学生在课下也可以通过自学方式,一边学习,一边思考,头脑中想象实验的具体流程及注意事项,很好地解决了实验预习中的盲目性问题,使得实验预习更加充分,实验过程更加得心应手[2]。

2 采用多媒体能够规范单元基本操作与实验技能

天然药物化学实验教学过程中基本操作多,连续训练、重复训练的机会比较少,学生在低年级学过的一些基本操作的细节认识变得模糊不清,在实验过程中感觉非常陌生,无所适从。我们在实验教学过程中,选取回流提取、过滤装置的搭配,薄层层析过程中制板、点样、展开、显色,柱层析过程中装柱、上样、层析等基本单元操作,采用多媒体形式演示规范的操作过程,对关键操作通过特写镜头加深学生的印象,并总结在各个过程中需要注意的事项。实践结果表明,采用多媒体规范实验基本操作和技能,对强化学生的感性认识是一种有效的辅助手段。学生可以体验整个操作过程,始终处于观察、操作、思考的循环中,通过多次循环,学生将操作环节和操作要点熟记于心,实验过程中会加倍注意。同时,这种规范化的操作可以在一定程度上纠正学生可能出现的错误,对培养他们严谨的科学态度和良好的实验室工作作风也有一定的帮助[3]。

3 采用多媒体能够演示新技术的应用,扩大教学容量

现代科学技术广泛应用于天然药物化学领域,新的提取分离技术,结构鉴定手段层出不穷,仅凭实验中的学习和操作会造成学生在某些实验手段和知识结构上出现欠缺,也会造成理论与实践的脱节,影响到学生今后的发展。通过多媒体技术可以在有限的时间内演示新的提取分离技术,从而扩大了教学容量,节约教学时间,对于培养学生创新思维也会起到很好的作用。

大孔吸附树脂分离、离子交换分离、葡聚糖凝胶层析、金属螯合层析是经典的分离方法,由于时间限制在实验教学中很少被提及。超声、微波提取、超临界CO2萃取、高速逆流层析、高效液相色谱等是新兴提取分离技术,红外光谱、磁共振、圆二色谱是天然产物结构鉴定过程中常用的手段,由于仪器设备昂贵,学生基本只有在毕业论文环节中才有机会使用,若在天然药物化学实验教学中不加以提及,学生到时候便会茫然不知所措。借助多媒体技术,对仪器原理和实验过程仿真模拟,展现各种仪器结构,动态演示提取分离、结构鉴定过程,采用录像方式录制真人演示这些仪器的使用操作规程及注意事项。学生在观看的过程中具有身临其境的感觉,同时也提高了自己的实验技能。

4 采用多媒体技术模拟特化实验,加强实验管理

天然产物鉴定实验中常涉及到一些有毒有害试剂的反应,如醋酸铅、氢氧化钙等。传统实验中大多使用完毕后随水从下水道流出,污染了周围环境。采用多媒体技术模拟该类反应原理,不仅可以达到与实际操作相同的效果,也可以减少环境污染,有利于学生树立绿色化学实验的理念,增强环保意识。一些实验操作不当会引起不良后果甚至酿成事故,用多媒体技术动画模拟这些错误操作,将其步骤分解,动作慢放,不仅能把错误的原因演示清楚,而且可以渲染气氛,使学生看后印象深刻[4]。同时实验室也会突发有毒溶剂泄漏、提取过程爆沸、突然起火等类似事件,若没有预先的安全教育,后果不堪设想。采用多媒体技术模拟突发事件产生的可能原因及处理方法和措施,加强防毒、防火、防爆的实验室安全教育,有利于培养学生实验室安全的责任感和使命感,有利于实验室的常规管理。

5 采用多媒体技术演示工业化生产过程,加强理论联系实际

学生最终要走向社会,成为社会的一员,尤其对于制药工程专业的学生,实验室中的实验教学不能满足他们对工程的需要。怎样将实验室与实际生产过程相互结合在一起?理论联系实际成为解决这一难题的关键。我们充分利用本专业制药工艺实验室小试车间的教学资源和当地实践基地教学资源,利用多媒体模拟演示小试车间50 L提取浓缩机组及制药企业10 m3提取浓缩罐的生产过程,演示制药企业超滤分离的原理及操作过程。利用这种方式大大拉近了实验室与工业化生产过程之间的距离,开阔了学生的视野,加快了他们适应现代化企业的速度,提高了他们的实际实践能力。

6 小结

将多媒体技术应用于天然药物化学实验的教学中,可以规范实验基本操作和技能,培养学生严谨的科学态度和良好的实验室工作作风;可以利用人机对话的交互功能,充分发挥学生的主动性和积极性;可以实现实验过程中零排放、零污染的绿色化学理念。当然,在使用过程中,还要注意与传统教学方式有机结合,从中选取最适宜的教学手段,才能充分发挥多媒体技术在天然药物化学实验中的重要作用。

[参考文献]

[1]高丽君,崔建华,苗苗,等.天然药物化学发现式实验教学的探索与运用[J].药学教育,2007,23(1):31-33.

[2]付颖,徐雅琴,李颖娇,等.大学化学实验教学中应用多媒体的实践与思考[J].东北农业大学学报:社会科学版,2007,5(1):84-85.

篇5

li ziqiang, duan jing

(pharmacological college of liaoning medical university,jinzhou 121000,china;college of animal sciences and technology of liaoning medical university,jinzhou 121000 china)

abstract:objectiveto study the experimental education model of natural medicine chemistry and cultivate students' were thinking ability and innovative spirit. methods32 four-year undergraduate students (grade 2004) were divided into eight groups.each group consisted of four persons.each one designed various extraction and separation methods on the extraction, isolation and identification experiment of hesperidin. resultsfinal product of each one was hesperidin.but there were some differences in yield and purity.so students had a perceptual self-acknowledgement and comparison for various extraction and separation methods of hesperidin. conclusiondesigning experimental mode of different methods at the same experiment mobilizes sufficiently students' learning enthusiasm and improves the ability for resolving practical problem and innovation.thus,it is worth promoting applying in pharmaceutical field.

key words:designing experiment for different method and synchnization;  experiment  of natural medicine chemistry;  innovative spirit

     

创新精神与社会发展、教育进步之间关系复杂,纵观发达国家快速发展的进程,无一不是重视创新的结果[1]。当前,我们的人才培养存在着创新精神和创造能力不足的弱点,究其原因,其中重要一点是实践环节教学方法仍为机械式、灌注式教学[2],由教师先讲解、再演示,学生按照预设的模式、计划和步骤去达到实验的目标。这种教学模式是以教师为主体,学生处于被动学习的局面,影响了学生的求知欲和创造欲。这样的教学方法不可能真正起到培养学生综合运用所学知识和解决问题能力的作用,达不到开发学生智力和培养实验研究能力的目的,体现不了实验教学中学生的主体地位,忽视了在实验教学中激发学生能动的创造性能力。异法同步实验是指在同一实验室、同一时间内同步进行两种目的相同、但方法不同的实验项目。设计性实验是指给定实验目的要求和实验条件,由学生自行设计实验方案并加以实现的实验。本文以橙皮苷的提取、分离和鉴定实验为例,结合两种实验方法建立了异法同步设计性实验模式并在我校本科教学中进行了实践探索,取得了良好的教学效果,充分调动了学生的积极性,大大提高了其独立解决实际问题的能力及创新能力。

1  异法同步设计性实验的教学研究

1.1  实验内容与安排

1.1.1  基础阶段首先要求学生制订实验方案,根据实验目的和实验原理,设计实验方法,再选择仪器并周密分析实验中可能出现的问题,拟定好消除或减少这些问题的措施和办法,最后确定实验的具体步骤并提出实验实施中应注意的事项。通过指导教师审核对橙皮苷的提取、分离和鉴定选取了以下4种方法:实验方法1:溶剂提取法。①陈皮的预处理:将干燥的陈皮粉碎至1~2 mm,称取30 g,加入0.002 mol/l稀盐酸,在室温下搅拌30 min,重复用0.002 mol/l的稀盐酸洗涤两次,再用流水洗涤。控干后,置于20倍量的去离子水中,用盐酸调节ph值为2,在85~90℃下搅拌提取1h,过滤,滤渣作为提取橙皮苷所用。②粗制橙皮苷:将滤渣烘干,加入10倍量的甲醇,在85℃的水浴锅中浸提4 h(带回流装置)后,过滤,除去滤渣,滤液蒸镏回收甲醇后,调节ph值,静置过夜,离心分离得粗橙皮苷。③精制橙皮苷:取粗品加入甲醇和0.1%氢氧化钠使其完全溶解,过滤,滤液中加入盐酸调节ph,再静置过夜,过滤得白色晶体,烘干,即得精制橙皮苷。实验方法2:碱溶酸沉法。①粗制橙皮苷:取100 g陈皮粉,加蒸馏水1 500 ml,再加na2co3 75 g,浸泡4 h,离心15 min(5 ×1 000 r/min),得离心液。用浓盐酸调ph值至5,静置过夜,得沉淀。沉淀加入5% na2co3,使之完全溶解。重复操作重结晶2次。所得结晶用蒸馏水洗涤,除去水溶性杂质。再用少量50%乙醇快速洗涤一次,除去部分色素,挥干溶剂,得粗制橙皮苷。②精制橙皮苷:取粗制橙皮苷用水加热溶解,上d—101树脂柱,水洗除杂质,再用50% 乙醇洗脱,洗脱液旋转减压浓缩,真空干燥,得精制橙皮苷。实验方法3:称取100 g陈皮,粉碎成粗粉,乙醇回流提取2次,1.5 h/次,第一次加乙醇400 ml,第二次300 ml,过滤并合并滤液,回收乙醇至120 ml,放置过夜,抽滤得沉淀。沉淀依次用适量氯仿、乙醇、蒸馏水洗涤,甲醇重结晶,60℃真空干燥并称重。实验方法4:①称取100 g陈皮,粉碎成粗粉,用2%naoh的65% 乙醇400,300 ml回流提取2次,1.5 h/次,合并滤液,用浓盐酸调节ph 6~7,回收乙醇至120 ml,放置过夜,抽滤,沉淀依次用适量氯仿、乙醇、蒸馏水洗涤,甲醇重结晶,60℃真空干燥并称重。 橙皮苷的鉴定方法: 样品和材料:橙皮苷对照品、硅胶g预制板、定量毛细管;展  开  剂:醋酸乙酯-甲醇-水(100∶17∶13);显  色  剂:2%三氯化铝乙醇溶液;置紫外灯(365 nm)下检视,样品和对照品对照观察。

1.1.2  实施阶段这是实验的关键阶段,也是主体阶段。主要是根据自己“最佳”的设计方案,正确组装好实验仪器和准备实验药品;根据拟定的实验步骤进行实验操作,观察实验现象,准确无误地记录实验数据。实验方法组合如下:方法1加方法3、方法1加方法4、方法2加方法3、方法2加方法4,每组任选其一,每组两种实验方法同时进行。

1.1.3  总结报告阶段即实验结果形成阶段。通过对实验现象的观察,对获得的产品、取得的有关数据和资料运用学过的相关知识,进行分析、综合、判断、推理等(或对产品进行纯度分析,对产品的物理、化学性质等进行分析鉴定),获得设计性实验的结果。在获得实验结果之后,还应该对实验步骤进行反思、讨论。在此阶段中,学生应就自己的设计性实验情况写出实验报告,对实验全过程予以总结,最后写出实验论文,论文格式严格按照正式论文格式。这是使知识巩固、方法迁移、能力提高的重要环节 。8个实验组都获得了比较理想的实验效果,达到了预期的实验目的,4种方法都可用于实验教学。

1.2  实验结果及评价

1.2.1  提高学习能力在异法同步设计性实验教学过程中,学生们认真查阅资料,积极动脑分析,掌握了橙皮苷研究的最新动态和方法。通过学生自主设计实验,在各种方案中对比分析,并在实际操作中有许多创新之处(如节约溶剂、节省时间等一些细节),可以学习到相关的新知识,熟悉使用各种仪器设备的方法,极大地提高了学生自学能力,变被动为主动学习,增强了学生接纳、学习新知识的能力。同步使用不同方法提取分离同一有效成分也有别于以往实验的单一模式,学生在对提取分离方法比较的同时,激发了学习兴趣,从而自然地掌握了黄酮类化合物理化性质和中药有效成分提取分离及测定的基本方法。该实验对于提高学生的综合素质,养成良好的科研习惯,培养创新思维有较大的促进作用。4种工艺是运用不同的提取原理,均能得到橙皮苷。各组采用的提取分离方法不同、设计的提取工艺路线不同,而最终产物却相同,使学生对几种橙皮苷的提取分离方法有一个感性的自我认识和比较。从而调动学生的自我创作能力,发挥各自想象空间,开拓其思路,真正的做到理论指导实践。

1.2.2  培养创新能力异法同步设计性实验要求学生通过查文献、收集材料、提出药品试剂和仪器设备计划、拟定实验方案,打破以往教师讲、照书做、实验方法单一的验证性实验模式,培养了学生运用知识解决实际问题的能力。从而培养了学生开拓思维,积极创新的良好精神,提高了学生的实践能力和对科研的自信心,为以后学习和工作奠定良好的基础。在实验教学中,为学生提供了自主创造的空间,有效的培养了学生的独立思考能力和科研能力。同时实验论文的写作是一个总结再创造的过程。通过认真地反思,分析总结经验教训,对实验提出改进的意见和设想,提高了分析问题能力及论文写作水平。实验及论文的写作过程,提高了学生的实践能力及综合素质,促进了学生创新能力的提高。

2  讨论

     

以前做天然药物化学实验,由于实验原理、步骤、结论等都是已知的,实验方法也是唯一的,学生参与实验的积极性不高,对实验课应付了事,实验报告互相抄写,难以收到较好的教学效果。而完成异法同步设计性实验项目,学生必须主动地学习、思考、分析才能决定实验方案,彻底改变以前照抄照搬实验方法单一的验证性实验模式,大大提高了学生的自学能力,由原来的被动学习变成主动学习,激发了学生的学习兴趣。

     

天然药物化学实验操作间歇时间比较长,如回流、煎煮、静置等实验操作。学生在这部分时间内大部分空闲,感觉没有事情做。异法同步设计性实验要求每组选定两种实验方法,并且同时进行。两种实验方法的提取分离方法不同、而最终产物却相同,使学生对橙皮苷的提取分离方法有一个感性的自我认识和比较。从而既调动了学生的积极性,启发了发散式思维,又让学生锻炼了更多的基本操作技能,树立了独立科研的信心。

   

在实施异法同步设计性实验时,要求学生必须进行反复认真地独立思考,按照实验方案实施,灵活解决实验过程中出现的各种问题。这不仅培养了学生的独立科研能力,而且提高了学生分析问题、解决问题的能力。由于实验方案是学生自行设计提出的,为了做好实验,学生积极思考实验中的操作细节,创造条件争取实验成功,进一步锻炼了学生的独立思考能力。

3  结语

   

开展异法同步设计性实验,学生自己查阅文献、自行设计实验方案、选择实验仪器和试剂、独立完成实验操作,最后提交论文报告,不仅有助于培养学生灵活运用所学理论和实验知识,分析归纳、解决实际问题的能力,而且有助于激发学生的主动探索精神,促进学生创新精神和实践能力的形成和发展,对学生的创新能力培养起到了积极的促进作用。

   

创新源于实践,没有实践,创新则无从谈起。异法同步设计性实验打破了传统的以教师为中心的教学模式,把自主权交给学生,给予学生充分的思维空间和实验设计的自主性,从而加强了学生的自学意识和自学能力,锻炼了学生的创新意识和思维能力,它作为一种新的实验教学模式对培养学生的创新能力起着重要的作用,是实验教学发展的必然趋势。在今后的工作中,我们将进一步充实完善异法同步设计性实验教学的内容,为学生提供更为广阔的思维空间,以达到提高学生科研素质的实验教学目的。

篇6

[中图分类号] G642 [文献标识码] C [文章编号] 1673-7210(2013)11(b)-0155-03

Effects of scientific research projects in traditional chinese medicine "ladder model" practice

KANG Wenyi KONG Xiangmi GUAN Aimin WEI Jinfeng

Institute of Traditional Chinses Medicine of He′nan University, He′nan Province, Kaifeng 475004, China

[Abstract] Practice and innovation are the essential condition for traditional Chinese medicine (TCM) developement. The development of innovative drugs is the key for competition during TCM enterprises development. It is also the sustainable power for development of Chinese enterprise in the future. Developement of new drugs need the funds to support scientific research projects. The paper elucidated the innovative feature of scientific research projects for training methods. The system of "ladder model" of TCM innovative and practice training pattern is established for undergraduate education. The problem, including scientific thinking and practice ability and question in scientific research projects are discussed.

[Key words] Scientific research projects; Traditional Chinese medicine; "Ladder model" practice

[基金项目] 河南省科技攻关(重点项目)(编号122102310170);河南大学第十二批校级教学改革研究项目。

[作者简介] 康文艺(1971.1-),男,汉族,黑龙江尚志人,博士后,教授,中药学和药理学硕士生导师,主要从事药用、食用植物化学及活性研究。担任河南省中药学博士后创新团队副主任;河南省生物医药技改专家;首批河南省科技特派员;发表研究论文近300篇,40余篇SCI收录,授权国家发明专利19项;主持国家自然科学基金、河南省科技厅重点攻关项目等12项。

中药学继承和发展了古代本草学,专门研究中药基本理论和各种药材饮片、中成药的来源、采制、性能、功效及临床应用等知识。近年来我国中药科学技术的发展十分迅速,医药经济也成为国民经济发展最快的行业之一,对中药的开发研究成为现在紧迫的任务。中药走向世界的基础是中药现代化,其关键是学术指导思想的现代化;其核心是提高新药的科研能力和技术。

新药的开发需要大量科研项目的经费支持,国家在推动技术创新、增强综合国力方面投入了大量的人力、物力和财力,高校也承担了一大批各类科研项目,科研经费总量和科技创新能力显著提高。科研项目的实施对在校大学生进行了科研创新能力和实践动手能力的培养,提高了学生的科研思维和解决问题的能力,并取得了良好的效果。“阶梯式”教学是根据中药学学科的特点,依据学生的实际水平因材施教,在一个循环式的培养模式下,引导学生渐进式的从了解、熟悉到掌握中药学学科的精髓,形成良好的学习习惯的方法[1],其培养模式主要特点是目标具体升级适度,符合学生的心理使学生有成就感。在以往的教学改革研究基础上[2-3],本研究提出中药学“阶梯式”实践与创新培养模式与科研项目实施相结合,为中药的发展提供了动力,同时为社会培养了人才。

1 科研项目基本过程及取得的成绩

1.1 基本过程

1.1.1 培养人才选择基本原则 科研项目的实施中需要选择一定的专业人才进行培养,参加项目成员必须具备一定的专业知识,对学术思想、技术路线的制订与理论分析及对项目的完成目的熟悉。承担项目的人才培养选择一般为大学高年级的药学专业人才,大四年级学生及在校研究生作为主要培养对象,在此阶段,学生必须熟悉本专业的知识以及掌握本专业的实验技能,主要培养这些学生的科研思维和解决实践问题的能力,并且在项目执行过程中逐渐熟悉科研项目的中期检查、结题、验收和经费合理使用等基本的常识性内容[4]。

因此,在中药学“阶梯式”实践和创新性培养中培养对象的选择需要针对科研项目的内容进行,项目执行的时间也是选择的一个条件。

1.1.2 研发实施阶段的培养 科研项目的研发实施阶段是科研项目全过程的重点和核心。在这一阶段包括科研项目的开展和控制两个方面。项目负责人需要依据立项的内容和执行时间,指导项目参与学生按照项目任务书进行实施。该阶段需要指导文献的搜集、整理和方案的制定,参与项目的学生们能从中训练出有效阅读中外文专业文献的能力,如何通过阅读文献,有助于综合分析和解决问题的能力的提高,形成了一种独立思考和解决科研或实践中问题的能力,并能积累一定的实践动手能力和科研创新能力。此阶段是中药学阶梯式实践与创新中的创新环节,也是一个系统和基础的工程,对初次接触科研项目的学生而言,是科研思路的初步形成阶段。

研究方案的执行阶段是学生动手能力和创性能力的建立的关键环节。此阶段有助于学生自主能力的提升,教师承担的主要任务是引导和鼓励学生运用专业知识、技能和文献分析能力解决课题中遇到的问题、整理实验数据和总结课题进展。

科研项目的结题和验收是科研项目过程的后期阶段,也是科研项目过程的重要环节。在该阶段对学生的培养主要集中在原始资料的保存、原始数据与成果的之间的核查与重复,体现了科学研究的严谨性和客观性,并初步掌握科研项目全过程、结果和应用、突破关键技术等的总结。

1.2 取得的成绩

本研究通过科研项目建立了中药学“阶梯式”教学与实践培养模式,对大四本科生及在读研究生进行实践动手能力和科研创新思维方式的培育,我们课题组相继完成的科研项目有河南省科技厅基础前沿计划、河南省科技重点攻关项目、河南省卫生厅医学科技攻关计划和河南省教育厅自然科学研究资助计划项目等12项。

科研项目中培养的研究生王金梅在连翘成分研究中3篇[5-7],在其他科研项目中发表英文文章3篇[8-10],本课题组在茜草研究中论文5篇[11-15]。在实施科研项目过程中,本课题组授权专利为一种天然化合物熊果酸在抗菌方面的应用同时发表了相关论文[16],一种连翘降血脂有效部位及其制备方法的应用和卷柏降血脂有效部位及其提取方法的应用以及穗花衫双黄酮的提取方法。培养的本科生邢晗、郭贝贝等同学在河南省科技厅项目中《南瓜降血糖作用研究》5篇[17-21],并分别于2013年考取中国药科大学研究生、浙江大学研究生。

2 科研项目在中药学阶梯式实践和创新中存在的问题

科研项目实施过程中能很好的培养学生的实际动手能力和科研思维,但也存在一些问题。

2.1 大学生科研研究课题存在的问题

本科教育存在重教学、轻科研,教学和科研相脱离的现象,确定科研课题的来源和形式进一步做理论和实践的分析,丰富创造性人才的培养模式具有重要的意义。科研研究课题存在以下问题:①项目覆盖范围不广。不同课题组研究方向较为集中,获得资助的课题研究内容主要为课题组长期从事的领域。②项目形式较单一。目前科研选题大部分在本专业和本学科内部实施,学科间渗透性和交叉性较差。科研项目应涉及各个学科,有利用提高学生多思维分散型的培养,有利于培养高素质的发展潜力的人才。③项目的开发性不够。

2.2 学生对科研的认识模糊

大部分学生将科研等同于社会调查或读书报告,对科研的认识高度不够。没有认识到科研中的精髓即探索精神,这种认识层面会导致大部分学生对科研项目的投入不够,科研素质中探索能力及团队协作能力得不到锻炼。

2.3 只重视结果不重视过程

现在部分大学生参与科研项目多数为了在找工作中增加一个就业砝码,只是为了一张科研证书,抱着这样的态度,导致学生不能够完全投入到科研项目中去。科研素养包括与科研相关的知识、研究能力、研究方法、研究习惯、研究态度及研究意识等等。提高学生科研素养必须让学生认识科研,了解科研的基本途径和方法,并灌输科研与创新之间的关系,既要认识到科研创新的艰苦性又需要学生树立科研探索的精神。

3 小结

科研项目的实施是培养大学生创新能力的一个平台,能够培养本科生提高提出问题、解决问题的能力,通过对本科生科研的培养,可以使本科生掌握科研的方法,提高科研能力和探索精神,为研究生阶段的学习打下坚实的基础。培养研究生实践动手能力和科研思维的能力,增强研究生对专业深度的理解及学生的竞争力。中药学“阶梯式”实践与创新培养模式与科研项目实施相结合,为中药的发展提供了动力。科研项目为中药新药的开发提供了经费支持,有助于中药的发展,同时为社会培养了人才。

[参考文献]

[1] 魏金凤,王金梅,李昌勤,等.中药学“阶梯式”实践与创新培养模式研究[J].生物技术世界,2012,39(9):49.

[2] 康文艺.研究性学习在天然药物化学实验教学中的实践[J].科技咨讯,2010,(22):182-183.

[3] 康文艺,王金梅,冯文平,等.自主设计法在天然药物化学实验教学中的应用[J].药学教育,2011,27(3):55-57.

[4] 王培卿,王金梅,李昌勤,等.大学生创新性计划在中药学“阶梯式”实践中的作用[J].中国医药科学,2012,3(3):144-145.

[5] 康文艺,王金梅,张丽.河南产连翘叶抑制α-葡萄糖苷酶活性成分研究[J].中国中药杂志,2010,35(9):1156-1159.

[6] 王金梅,姬志强,康文艺.连翘花蕾与花的挥发性成分研究[J].天然产物研究与开发,2011,23(6):458-463.

[7] 孙建勋,杨飞,王金梅,等.固相微萃取—气质联用法分析贵州产贯叶连翘叶挥发性成分[J].中国实验方剂学杂志,2011, 17(11):96-99.

[8] 王金梅,康文艺.贴梗海棠挥发性成分研究[J].天然产物研究与开发,2010,22(2):248-252.

[9] 康文艺,王金梅.四个桂花品种挥发油成分研究[J].天然产物研究与开发,2010,22(5):807-811.

[10] 康文艺,王金梅.白碧桃挥发性成分的快速分析[J].天然产物研究与开发,2010,22(3),442-444,454.

[11] 康文艺,臧鑫炎,李黎.茜草抗氧化成分研究[J].河南大学学报,2006,25(3):6.

[12] 康文艺,郅妙利,王金梅,等.RP-HPLC法测定茜草中1,3,6-Trihydroxy-2-methylanthraquinone-3-O-[3-O-Acetyl-α-L-rhamnopyranosyl-(12)-β-D-glucopyranoside的含量[J].天然产物研究与开发,2008,20(2):295.

[13] 康文艺,张丽,宋艳丽.茜草抑制α-葡萄糖苷酶活性成分研究[J].中国中药杂志,2009,34(9):1104-1107.

[14] 杨宇婷,康文艺.HPLC法测定茜草及不同炮制品种大叶茜草素[J].中成药,2011,33(12):2125-2127.

[15] 康文艺,贺光东,郅妙利.RP-HPLC测定不同产地茜草中大叶茜草素含量[J].中成药,2009,31(12):1960-1962.

[16] 康文艺,王二辉.三种中草药挥发油抗菌活性研究[J].河南大学学报,2007,26(3):7-8.

[17] 王佳佳,邢晗,康文艺,等.HS-SPME-GC-MS法分析树莓饮品中挥发性成分[J].河南大学学报:医学版,2012,31(3):223-224.

[18] 王佳佳,邢晗,康文艺,等.HS-SPME/GC-MS法分析红树莓哈瑞特斯果实中挥发性成分[J].河南大学学报:医学版,2012,31(3):227-228,232.

[19] 邢晗,李昌勤,康文艺,等.6种南瓜栽培品种体外抗氧化活性研究[J],食品工业科技,2012,33(15):90-92.

篇7

苔藓植物是一类绿色多细胞、无维管束的高等植物,它们分布广泛,适应性很强,被生态学者誉为大自然的拓荒者。从近几十年来苔藓植物化学研究的结果表明是潜在的天然活性产物的宝库。从苔藓植物体中已经分离到的次生代谢产物主要有有萜类、甾椁、芳香族化合物及脂类等,而在其它高等植物中广泛存在的生物碱,苔藓植物几乎完全缺乏[[1]]。在日益强调环境保护、提倡发展可持续农业的今天,天然产物愈来愈受到重视生物论文,值得注意的是苔藓植物中含有的一些特殊的活性成分,具有极大的开发利用价值。更多的学者研究苔藓植物对其它植物生长的影响。如杜桂森利用羊角藓、山羽藓、塔藓、细叶金发藓和温带光萼苔5种苔藓植物配子体的水提液对小麦、玉米、大豆、落花生、菜豆5种作物进行种子萌发研究,发现4种藓类对作物种子萌发均有不同程度的促进作用,而苔类则对作物种子的萌发有不同程度的抑制作用。认为可能是藓类与苔类配子体的主要次生代谢产物或内源激素不同[[2]]。刘莹等研究发现灰藓、北地扭口藓的配子体水提液对作物种子萌发均有不同程度的促进作用,对农作物的胚根促进作用显著,提高了种子的萌发质量,认为藓类配子体的主要次生代谢产物或内源激素具有生物活性[[3]]。但是在他们的实验过程中,并没有设置浓度梯度,因此不能反映苔藓植物体不同浓度条件下对受试作物种子的萌发和幼苗生长的影响。

白发藓和大灰藓在我国各地有广泛的分布,并常常在局部区域形成单优势种,很有可能在植物体内存在着影响其它植物生长的一些活性物质,研究它们对作物种子萌发和幼苗生长的影响,可以为更好地开发利用这些天然资源提供切实可行的理论依据。本试验以绿豆、萝卜、甜椒、油菜、玉米5种作物种子为材料,测定白发藓和大灰藓水提取液对5种作物种子萌发的发芽率、胚根长、胚根重,幼苗鲜重等指标生物论文,以期得出两种藓类对作物种子萌发和幼苗生长的影响潜力,评估两种藓类利用的前景。

1材料与方法

1.1材料

白发藓Leucobryum javense采自浙江丽水白云山景区石面,大灰藓Hypnum plumaeforme采自浙江南明山景区石面免费论文。绿豆、萝卜、甜椒、油菜、玉米5种作物种子均购自种子商店。

1.2方法

1.2.1苔藓植物水提取液

苔藓植物配子体用自来水冲洗干净,去掉杂质,再用蒸馏水冲洗干净,晾干。准确称取两种苔藓植物干样各5g,分别放入500ml三角烧瓶中(内有200ml蒸馏水并已中预热半小时),并继续于70℃恒温水浴中5h,取出冷却后减压抽滤,所得溶液为苔藓植物水提原液,浓度为25g·L-1。取50mL原液稀释至250mL,得到中等浓度稀释液,浓度为5g·L-1。取50mL中等浓度稀释液,稀释至250mL,得到低浓度稀释液生物论文,浓度为0.5 g·L-1。

1.2.2种子萌发试验

将5种作物种子经自来水冲洗干净,在相应浓度提取液中浸泡2h取出用滤纸吸干表面。在每个培养皿中放入两层滤纸,经高温高压灭菌后加8mL不同浓度苔藓水提取液,以蒸馏水为对照。均匀地放入50粒作物种子。用保鲜膜覆盖培养皿以防止水分蒸发。25℃下黑暗培养6天。第3天后补加2mL水提液以弥补液体流失。每24h在相同的时间段记录作物种子每天的发芽粒数,以连续两天发芽数不再增加视为萌发结束。等萌发实验结束时用直尺测量种子胚芽胚根的长,用FA1004型电子天平称胚根、幼苗的鲜重。在此基础上计算发芽率。

绿豆在第4天萌发结束。萝卜在第5天萌发结束。油菜、玉米在第6天萌发结束。而甜椒则因为萌发较慢,从第7天开始记录有萌发,一直持续6天萌发结束。

1.2.3 数据统计

所有实验处理均设3次重复,结果用平均值±标准差表示,用SPSS16.0统计软件,采用单因素方差分析和LSD多重比较检验各处理组间的差异显著性水平。

2 结果和分析

2.1 白发藓和大灰藓水提取液对绿豆种子萌发的影响

表1 白发藓和大灰藓水提液对绿豆、萝卜、甜椒、油菜和玉米种子萌发的影响

Table 1 Influences of aqueous extraction ofLeucobryum javense and Hypnum plumaeforme on germination onseedling of Vigna radiate,Raphanus sativus,Capsicum annuum,Brassica campestris and Zea mays.

 

测量

指标

Indices

苔藓植物的水提取液浓度

Aqueus extraction concentration of Bryphytes(g·L-1)

作物 Crop species

 

 

绿豆

V.radiata

萝卜

R.sativus

甜椒

C.annuum

油菜

B.campestris

玉米

Z.mays

发芽率

Germinating rate

对照

1±0a

0.94±0.02a

3.57±0.2a

0.58±0.11a

0.85±0.03a

白发藓

25

0.99±0.01a

0.82±0.06b

4.07±0.03a

0.25±0.02b

0.83±0.02a

5

0.99±0.01a

0.85±0.06ab

3.37±0.07ab

0.44±0.06a

0.85±0.01a

0.5

1±0.02a

0.93±0.02ab

3.9±0.21a

0.42±0.07ab

0.88±0.02a

大灰藓

25

0.99±0.01a

0.84±0.03ab

3.57±0.17a

0.57±0.01a

0.75±0.05b

5

0.99±0.01a

0.94±0.01a

3.9±0.2a

0.53±0.06a

0.82±0.02ab

0.5

0.99±0.01a

0.88±0.04ab

3.63±0.29a

0.46±0.03a

0.79±0.01abc

平均胚根鲜重

Fresh radical weight

(mg·株-1)

对照

34.51±4.01a

6.33±1.54a

8.49±0.88a

0.97±0.42a

49.26±6.92a

白发藓

25

32.55±1.8a

5.68±1.11a

7.9±0.98a

1.15±0.19a

43.86±4.33a

5

28.21±2.89a

9.3±0.77ab

9.07±0.51a

1.64±0.06a

38.8±4.63a

0.5

34.82±1.99a

6.47±0.65a

8.38±0.72a

2.22±0.32ab

50.46±5.06a

大灰藓

25

35.11±1.68a

5.47±0.65ac

8.14±0.4a

2.28±0.11ab

48.67±4.36a

5

25.6±2.88ab

6.94±0.75a

9.92±1.33a

2.37±0.36ab

48.08±3.4a

0.5

37.41±2.93ac

8.04±1.59a

9.16±0.73a

2.89±0.24b

52.96±0.71ab

幼苗鲜重

Fresh seedling weight

(mg·株-1)

对照

161.73±1.39a

65.68±2.21a

25.73±1.04a

12.98±3.05a

425.69±15.56a

白发藓

25

149.21±2.45b

44.21±3.86b

28.36±1.66a

9.89±0.25a

416.79±4.31ab

5

157.23±2.94ab

62.77±1.16a

26.34±0.32a

13.6±1.05a

386.43±4.66b

0.5

152.81±3.25ab

61.47±2.42a

26.97±0.92a

17.33±1.82ab

395.05±15.75a

大灰藓

25

156.48±6.26ab

60.27±1.49a

31.22±3.03a

16.03±0.15ab

421.4±18.65a

5

150.67±2.56b

60.79±2.5a

31.62±3.93a

15.93±1.6ab

404.19±10.08a

0.5

163.47±3.33a

70.27±3.51ac

28.11±1.44a

17.07±1.35ab

424.9±8.59a

胚根长

Root length

(mm)

对照

33.45±2.66a

35.17±3.19a

9.18±0.17a

11.3±1.63 a

48.63±5.84a

白发藓

25

27.02±2.16b

12.99±5.44b

5.21±0.29b

6.97±1.3ab

43.56±4.86a

5

32.57±2.32ab

29.92±1.95a

9.87±0.7a

9.05±1.05a

40.23±4.06a

0.5

27.71±2.66ab

34.44±1.44a

7.63±0.75ad

13.18±1.42ad

49.74±4.18a

大灰藓

25

38.49±2.2ac

31.3±0.96a

7.92±0.92ad

12.09±0.25a

43.15±4.84a

5

36.41±0.83ac

32.63±1.75a

10.91±0.11abc

19.42±1.14bc

51.53±4.43a

0.5

37.59±0.95ac

48.16±4.12bc

篇8

生物工程综合实验根据专业核心课程的设置分为5个模块,即植物生物技术实验模块、植物天然产物开发实验模块、微生物发酵工程实验模块、蛋白质与酶工程实验模块、生物质炼制实验模块。根据上述5个模块,遴选相应实验项目,编写特色明显的实验指导教材。

2.1植物生物技术实验模块

植物生物技术实验具体安排如下6个项目:(1)植物组培实验室设计和实验设备、实验用品认知;(2)MS培养基母液的配制;(3)MS培养基配制、灭菌与分装;(4)外植体分化生长的诱导培养;(5)外植体脱分化生长的诱导培养(6)组培苗的炼苗。教学目的:掌握母液的配制方法;掌握培养基配制的步骤和灭菌方法;掌握不同材料(外植体)的消毒和接种方法;掌握获取愈伤组织的方法;通过本实验加深对几个基本概念(植物细胞全能性、分化、脱分化、再分化、愈伤组织、炼苗等)的理解。可执行性分析:依托“植物细胞工程安徽省工程技术研究中心”和“安徽省植物生物技术实训中心”两个平台,借助一整套成熟的植物组培技术和实践经验丰富的指导教师团队以及诸多的产学研合作基地,能够很好地将植物组织培养技术传授给学生,并付诸于实践。

2.2微生物发酵工程实验模块

微生物发酵工程实验具体安排如下4个项目:(1)固定化酵母细胞的制备;(2)固定化酵母细胞发酵制酒及其影响因素分析;(3)蜡状杆菌液体发酵产果胶酶;(4)啤酒生产。教学目的:学会制备固定化酵母细胞,并利用固定化酵母细胞进行酒精发酵;了解菌种的制备及其质量检测,学会使用二联发酵系统并进行规模发酵;学会使用圆柱露天锥形发酵罐发酵生产啤酒。可执行性分析:项目(1)、(2)属于研究性实验,根据实验指导书和文献资料的查阅,学生们能独立完成;项目(3)、(4)属于综合性实验,应用性极强,能激发同学们的兴趣,学生们通过课前查阅资料,带着问题进入实验室,在老师的指导下,自己动手操作,以期达到预期目标。

2.3蛋白质与酶工程实验模块

蛋白质与酶工程实验具体安排如下5个项目:(1)SDS-PAGE;(2)5-12%SDS-PAGE;(3)抗血清制备;(4)Westernblot;(5)猪血中超氧化物歧化酶(SOD)的分离纯化及活力测定。教学目的:学习SDS-PAGE测定蛋白质分子量的原理;掌握SDS-PAGE电泳的操作方法;了解抗血清制备的基本原理;掌握抗血清制备的操作步骤及方法;掌握应用Westernblot检测抗原及蛋白水平表达等;掌握SOD的分离纯化及活力测定。可执行性分析:5个实验的开设不仅让学生们掌握了基本的实验操作技能,而且为学生们更高层次的深造打下了坚实的基础,同时也推动了“皖西学院抗体制备及其质量检测中心”的可持续发展,加强了产学研项目的深入合作,师生共赢,校企共赢。

2.4植物天然产物开发实验模块

植物天然产物开发实验具体安排如下4个项目:(1)植物色素的提取、性质及稳定性:(2)黄酮类物质的提取、分离和性质;(3)植物多糖的提取、分离和性质;(4)油料作物中油脂的提取、精制和有关性质。教学目的:了解植物色素、黄酮类物质、植物多糖和油料作物中油脂等物质的提取方法、提取过程,学会运用单因素实验、正交实验等实验方法优化目标物质提取的最优条件,并通过提纯目标物质,研究其理化性质或生物活性。可执行性分析:植物天然产物开发涉及的范围较广,生物工程教研组根据实际情况开设了以上4个项目,其中第1个项目是我们开设的传统项目,后3个项目与我们教师的科研课题密切相关,是我校研究的优势项目,实验条件优越,仪器设备齐全,能够达到教学和科研的优势互补,教学相长。

2.5生物质炼制实验模块

生物质炼制实验具体安排如下4个项目:(1)了解生物工程企业生产环境及生产技术原理;(2)比较不同生物工程行业废水检测方法;(3)熟练掌握废水BOD和COD的检测原理与方法;(4)利用农林废弃物进行生物质炼制提取木质素。教学目的:使学生了解相关生物工程企业的生产流程、生产技术原理、下游废水排放达标要求以及最重要的排放物生产过程检测方法,加强对生物生产和管理的达标排放的认识,同时学习相关检测方法。可执行性分析:我校生物工程专业在第五学期有2个月的企业实习,学生们根据兴趣进入相关企业,结合专业特点,学生们有选择的进行实习、实训,了解生物工程行业的进展和前景;另外借助校级“生物质炼制科技创新平台”,学生们能掌握废水BOD和COD的检测原理与方法,初步利用农林废弃物进行生物质炼制提取木质素等实验技能。

3生物工程综合实验课程的实施

3.1开设开放式实验

改大班集中实验为小组分散循环实验教学,由于发酵罐、啤酒发酵系统、气质联用仪、液相色谱仪、原子吸收光谱仪等实验设备台套数少以及组培室等实验场地的限制,又由于实验内容的需要,在操作上要求连续,在实际教学时就必须改变原来大班上课状况,只有将学生分散,以小组的形式进行训练,采取学生循环而实验项目固定的循环实验教学方式,才能最大限度地提高实验设备和实验场所的利用率。同时,建立生物工程专业综合实验操作训练的音视频、试题库等,完善实验用多媒体教室以及仿真实验室的建设。

3.2开设自主设计性实验

高等教育的目标是培养素质高、能力强的创新人才,如何实现“能力为重”的战略主题对高校创新人才培养提出新的要求。提高本科生的动手能力和创新意识一直是实验教学改革的主题。在自主设计性实验中,老师给出实验项目名称,学生们查阅资料,设计实验方案,然后与指导老师讨论实验方案的可行性,对无法实施的方案,老师给予适当的指导后重新设计,对可行方案进行讨论修改。在实验方案设计可行的情况下,学生们进行实验操作,观察现象,记录实验数据和实验结果,并对结果给予分析,撰写实验报告,准备ppt进行实验汇报。经过近3a的自主设计性实验的开设,学生们独立动手能力和创新思维能力得到了培养和提高,也大大激发了同学们自主学习的兴趣。

3.3开设研究性实验

充分发挥我院教师科研能力强的优势,将教师的科研成果引入教学,将科研课题转化为实验教学内容,把科研成果转化为实验项目,将科研设备开放于实验教学。既能让学生参与到教师的科研中去,培养学生科研的兴趣,又能在教师的带动下培养科研的思维。

篇9

婚姻状况: 未婚 求职意向及工作经历人才类型: 全职应聘职位:化学工程类、理科类、生物工程类

工作年限: 3职称: 中级求职类型: 全职 可到职日期:一个星期  月薪要求: 面议希望工作地区: 北京市上海市成都 个人工作经历:1996-XX,西北大学化学学院

1997-1999担任过院报编辑,校学生会学习小组干事。

1998.10-1999.5从槐米和荞麦皮中提取芦丁工艺研究

1999.2~XX.6从荞麦皮中提取纤维素,对纤维素与马来酸等接支反应,合成纤维素的衍生物

1999.9~1999.10河南洛阳中原油田分析测试中心实习

XX.9-XX.12四川自贡(中昊)晨光化工研究院

XX.9~XX.12四川自贡(中昊)晨光化工研究院环氧树脂车间实习工作

XX.1~XX.7四川自贡(中昊)晨光化工研究院环氧树脂车间实验室担任技术员,负责车间生产中间体的检测,车间生产问题解决和部分应用产品开发(环氧树脂稀释剂,环氧树脂灌封料和环氧树脂模具)

XX.8~XX.12四川自贡(中昊)晨光化工研究院工程中心环氧树脂研究组,参与开发一种电子级酚醛环氧树脂和新建车间的设计,申报材料的整理,前期实验的总结等工作,并成功进行了中试。

XX.1~XX.8西安新兴绝缘材料厂担任技术研发和厂长助理工作,主要负责车间生产,新产品的开发和产品报批等工作。。 教育背景毕业院校: sichaun daxue最高学历: 硕士毕业日期: XX-7所学专业一: 生物学类 所学专业二:受教育培训经历:本科 XX 年毕业于 西北大学化学系有机合成 专业

主要从事植物有效成分的分离和其衍生物的合成研究

硕士 XX 年毕业于 四川大学 生命科学学院

生物化学与分子生物学 专业 主要从事植物蛋白的功能研究 语言能力外语: 英语外语水平: 熟练国语水平: 精通 粤语水平: 一般 工作能力及其他专长本人具有较强和广泛的专业知识基础,较强的学习能力和合作精神,具有化工和生物制剂等工作经历。参与完成多项国家和省市研究项目,并完成多篇科技论文,得到同事和领导老师的好评。

在化学方面,天然产物有效成分的提取,有机合成和高分子材料合成与应用比较熟悉。

在生物学方面,生物化学的基本操作技能(蛋白提取、分离、检测(如:Western检测,荧光分析检测,蛋白基本性质的检测等);植物体功能蛋白的分离和提取,多克隆抗体的制备),基本分子实验技能(PCR,DNA/RNA的提取和大肠杆菌表达等)。对生物药学相关的实验设计和要求较为熟悉。

在仪器的使用方面,能够使用多种仪器( 紫外光谱UV, 红外光谱IR,原二色谱 CD, 荧光光谱FL,快速液相色谱FPLC, PAM2100叶绿素荧光,高效液相色谱HPLC等),并对主要分析仪器(核磁NMR,紫外光谱UV, 红外光谱IR,原二色谱 CD, 荧光光谱FL等)的结果能够准确分析。

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1 研究方法

1.1 样本筛选

所选中药均为《中华人民共和国药典》2005年版[3]所收载,主要归肺经的药物共计129种。

1.2 资料检索

129种归肺经中药的基本资料来源于《中华人民共和国药典》2005年版[3];化学成分类别构成的文献资料来源于清华同方全文期刊库、重庆维普全文期刊库以及美国化学文摘数据库,分别以129种归肺经中药的中文名、英文名、拉丁名进行化学成分及类别的资料检索。

1.3 统计方法

对129种归肺经中药基本资料、化学成分构成进行文献检索,将资料输入计算机,建立129种归肺经中药的化学成分信息数据库,对129种归肺经中药的化学成分类别构成情况与其归经作用的关系进行研究,采用SPSS13.0软件进行统计学处理,主要进行频数与排序统计。

1.4 化合物分类标准

参考《中药化学》[4]、《天然药物化学》[5]、《天然产物化学》[6],结合中药有效成分的特征,分为萜类、黄酮类、生物碱类、甾体类、苯丙素类、醌类、酚类、糖苷类、酯类、氨基酸、多肽类、蛋白质、芳香族、含硫化合物、含氧杂环、脂肪族类化合物。

2 研究结果

2.1 基本资料

2.1.1 归经构成情况

129种归肺经中药其归经的首位均为肺经,其中单归肺经的19种,占14.7%;归两经的63种,占48.8%;归三经的41种,占31.8%;归四经的5种,归五经的1种。

2.1.2 药材来源情况

129种归肺经中药为植物来源的116种,占89.9%;动物类药6种,占4.7%,矿物类药7种,占5.4%。

2.2 化合物频数构成情况

共收集化合物总频数6 107次,其中植物类肺经中药化合物出现频数5 873次,动物类肺经中药化合物频数是234次,矿物类肺经中药0次(无机盐未计算入内)。各类化合物在肺经中药中出现的频数见表1。表1 各类化合物在肺经中药中出现的频数(略)

从表1可以看出,肺经中药中化合物类别出现频数最高的是萜类化合物,占所有化合物频数的26.41%,其次是脂肪族、黄酮类、生物碱类化合物,这4种类别的化合物累计频数占到62.34%。

通过非参数Chi-Square 检验,各类化合物期望频数值为325,卡方值为9 353.997,自由度为17,P=0.00<0.01,可以认为各类化合物频数值差异是有统计学意义的。萜类化合物实际频数比期望频数高出1 288次,表明萜类化合物的频数明显高于期望值和其他化合物类别的实际频数。

2.3 含各类化合物类别的肺经中药情况

129种肺经中药中有124种有化合物构成的报道;含各类别化合物的肺经中药种数情况见表2。表2 各类别化合物在肺经中药中出现的种数情况(略)

从表2可以看出,大部分肺经中药(68.22%)含有萜类化合物,其次是脂肪族、甾体、生物碱、黄酮。

通过非参数Chi-Square 检验,含各类化合物肺经中药种数的期望值为42,卡方值为289.799,自由度为17,P=0.00<0.01,表明各类化合物在肺经中药中出现的种数值差异是有统计学意义的。而萜类化合物的出现频数值明显高于期望值。

2.4 不同归经数中药化合物类别构成的对比(见图1)

2.5 含萜类亚类的肺经中药情况

在129种肺经中药中有88种肺经中药含有萜类化合物,含萜类亚类的肺经中药情况见表3。表3 萜类亚类在肺经中药中出现的频数情况(略)

表3显示,三萜类化合物在肺经中药中出现的频数是最多的,接近一半肺经中药含有三萜化合物,其次是倍半萜、单萜,二萜最少。

3 讨论

以上研究结果表明,肺经中药中萜类化合物出现频数最高,其中又以三萜(尤其是五环三萜)最为多见;而且萜类化合物的出现频率随肺经中药归经数(除肺经外出现其他经)的增多而降低,具有一定的特异性。此外,脂肪族、甾体、生物碱、黄酮类在肺经中药中出现的频数也很高。

现代药理研究表明,萜类化合物对肺经系统疾病具有明显的药效作用,Shin CY等[7]对桔梗三萜类化合物的祛痰活性研究表明,桔梗皂苷D和D3通过雾化给药,能增加大鼠上皮细胞中黏液素的释放,而且比阳性对照药品ATP和Ambroxole的作用更强;缪氏等[8]发现,艾叶提取物α-萜品烯醇对哮喘小鼠气道炎症及外周血Th1/Th2平衡具有积极影响;唐氏等[9]发现单萜类化合物具有良好气管扩张和抗变态反应作用;李氏等[10]发现土贝母苷甲对肺部肿瘤细胞的细胞毒作用大于其他部位的肿瘤细胞。

生物碱类化合物同样是肺经中药中一类重要的有效化合物。如麻黄中麻黄碱具有松弛支气管平滑肌、收缩血管和升高血压等作用,临床主要用于支气管哮喘、过敏性反应、鼻黏膜肿胀及低血压等病症的治疗;山豆根中氧化苦参碱可显著减轻哮喘小鼠血管、气道周围炎性细胞浸润, 改善黏膜上皮坏死脱落情况,消除哮喘的主要病理基础,起到抗炎,平喘的作用[11]。

但萜类化合物、生物碱类化合物与黄酮类化合物是否就是归肺经中药的物质基础,肺经中药中所含的萜类化合物、生物碱类化合物及黄酮类化合物是否都对肺经系统的疾病具有特异性治疗作用,而且是通过什么途径、什么作用机制发挥归经作用,和有效成分在肺经系统的靶向作用和富集,以及体内第二信使,细胞受体特异性作用是否密切相关,其生物学规律又是什么,这些问题尚需进一步的实验来验证和阐释。

本研究以大样本量的归肺经中药整体化学成分作为研究对象,通过文献检索、化学信息统计等方法对归肺经中药的化学成分类别构成规律进行研究,得到归肺经中药化学成分类别构成的一般性规律。此方法简单可行,资料翔实,结论科学,符合中医药理论的整体观和对宏观规律的认知特点,为研究中药归经理论提供一种新的方法与思路。

参考文献

[1] 徐大椿.徐大椿医书全集(下册)[M].北京:人民卫生出版社,2000.

[2] 陆光伟.中药归经及其成分在体内的分布[J].中成药研究,1984,(5):38.

[3] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京:化学工业出版社,2005.

[4] 李 端.中药化学[M].北京:人民卫生出版社,2005.

[5] 姚新生.天然药物化学[M].第4版.北京:人民卫生出版社,2001.

[6] 徐任生.天然产物化学[M].第2版.北京:科学出版社,2004.

[7] Shin CY, Lee WJ, Lee EB, et al. Platycodin D and D3 increase airway mucin release in vivo and in vitro in rats and hamsters[J]. Planta Med,2002,68(3):221-225.

[8] 缪卫群.艾叶提取物α-萜品烯醇对哮喘小鼠气道炎症及外周血Th1/ Th2平衡的影响[D].杭州:浙江大学硕士学位论文,2005.

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一、天然气管道腐蚀的因素

(1)土壤腐蚀因素。土壤是具有固、液、气三相的多孔性的胶质体,土壤的空隙被气和水充满,水中含有一定的盐使土壤具有离子导电性。由于管道所埋土壤各处的物化性质不同、管道各部分的金相结构不同,如晶格缺陷、杂质、内部应力、表面粗糙程度等原因,一部分金属易电离,带正电的金属离子进入土壤中,从而该段电子过剩电位变负;而另一部分金属不容易电离,电位变正,从而在两段间发生电子流动即发生氧化还原反应。失去电子的管道段成为阳极区,得到电子管道段则成为阴极区,并和土壤一起组成回路,形成了电化学电流即腐蚀电流,从而产生了土壤腐蚀。

(2)管道腐蚀因素。长输埋地管道表面大都包裹有防腐层,将钢管和腐蚀介质隔离,切断电化学腐蚀电池的电路。 土壤腐蚀性介质从而浸入管体外壁,引起管道外腐蚀,再加上阴极保护不善,杂散电流的影响等均会使管道遭受腐蚀。

(3)金属材料因素。金属化学稳定性、合金成分、金属表面状态等都会影响金属材料的腐蚀性 。

(4)大气腐蚀。大气中含有水蒸气会在金属表面冷凝形成水膜,这种水膜由于溶解了空气中的气体及其它杂质,可起到电解液的作用,使金属表面发生电化学腐蚀。影响大气腐蚀的自然因素除污染物外还有气候条件。在非潮湿环境中,很多污染物几乎没有腐蚀效应。假如相对湿度超过80% ,腐蚀速度会迅速上升。因此,敷设在地沟中的管道或潮湿环境的架空管道表面极易锈蚀。

(5)细菌腐蚀 。细菌腐蚀也称微生物腐蚀,参与管道土壤腐蚀过程的细菌通常有硫酸盐还原菌、氧化菌 、铁细菌 、硝酸盐还原菌等。其中厌氧性硫酸盐还原菌最具代表性。它在pH6~ 8 碱性和透气性差的土壤中繁殖,广泛地分布在海、 河 、湖泊水田、 沼泽的淤泥中, 它利用自身的生息,将硫酸盐离子还原,同时促进阴极反应,生成硫化铁等腐蚀产物,覆于管道表面,形成二次的局部腐蚀(孔蚀),所以在硫酸盐还原菌腐蚀的现场,土壤颜色发黑,有硫化氢臭味。

(6)杂散电流腐蚀 。流散于大地中的电流对管道产生的腐蚀,又名干扰腐蚀,是一种外界因素引起的电化学腐蚀 。管道腐蚀部位由外部电流的极性和大小决定,其作用类似电解杂散电流从原油管道受电气化铁路的杂散电流腐蚀。在建成后约4个月即遭电流腐蚀穿孔交流电引起的腐蚀是在管道沿高压输电线敷设时,因电磁耦合在管道上感应的交流电所造成的,对人体和设备均有危害。

二、管道腐蚀防治措施

针对以上腐蚀原因提出相应防腐措施如下:

(1)涂层防护。涂层防护是管道防护最基本的方法。它的主要原理在于采用一些特殊材料涂抹到管道外侧,起到隔离金属管道的作用,腐蚀性物质无法与金属直接接触,因而起到防腐的作用。值得注意的是,有些管道在架设过程汇总不可避免的经过一些环境比较恶劣的地区,因此这就对涂膜材料的选择提出了要求。一般来说,涂膜材料应该满足以下几个要求:材料自身性能稳定,不会与周围腐蚀性物质发生反应,水的渗透率低,防止水与管道的接触,耐微生物腐蚀能力强,出现问题时方便修复,成本低,可以大规模使用,满足防腐要求的前提下满足工程要求。

(2)改善金属的本质。根据不同的用途选择不同的材料组成耐腐蚀合金,或在金属中添加合金元素,提高其耐蚀性,可以防止或减缓金属的腐蚀。例如,在钢中加入镍制成不锈钢可以增强钢的防腐蚀能力。

(3)电化学保护法。将被保护金属极化成阴极来防止金属腐蚀的方法。1928年第一次用于管道是将金属腐蚀电池中阴极不受腐蚀而阳极受腐蚀的原理应用于金属防腐技术上,利用外施电流迫使电解液中被保护金属表面全部阴极极化,则腐蚀就不会发生。判定管道是否达到阴极保护的指标有两项:一是最小保护电位,它是金属在电解液中阴极极化到腐蚀过程停止时的电位,其值与环境等因素有关,常用的数值为-850毫伏 (相对于铜-硫酸铜参比电极测定);二是最大保护电位,即被保护金属表面容许达到的最高电位值。

(4)改善环境。改善环境对减少和防止金属腐蚀有重要作用。例如,减少腐蚀介质的浓度,除去介质中的氧,控制环境温度、湿度等,都可以减少和防止金属腐蚀;也可以采用在腐蚀介质中添加能降低腐蚀速率的物质(缓蚀剂)来减少和防止金属腐蚀。

(5)电蚀防止法。一是在杂散电流源有关设施上采取措施,使漏泄电流减小到最低限度;二是在敷设管道时尽量避开杂散电流地区,或提高扰管段绝缘防腐层质量,采用屏蔽、加装绝缘法兰等措施;三是对干扰管道作排流保护,即将杂散电流从扰管道排回产生漏泄电流的电网中,以消除杂散电流对管道的腐蚀。

三、天然气管道腐蚀防治改进措施探讨

当前,相对国外管道防腐较为先进的技术而言,我国对城市天然气管道腐蚀防治的研究还存在着一些问题急需解决,管道防腐技术还有待改进。

3.1 积极开发管道防腐材料

我国当前所使用的管道防腐材料虽然基本已经实现了国产化,但是由于技术上的缺陷,所生产出来防腐材料难免会出现一些问题。因此,我们要加大对管道防腐材料的研究力度,通过借鉴国外先进的技术,结合国内的实情,运用到生产实践当中去,生产出高质量的材料来更好的进行管道腐蚀的防护。

3.2 积极提升腐蚀管道的定位技术

进行天然气管道腐蚀程度的测量需要我们拥有一个完善的防腐数据库管理系统,我们要不断的加强腐蚀管道的定位能力,使得腐蚀管道的定位快速而准确,这样才能够有效的找出天然气管道的安全问题,排除安全隐患。当前我国在这一方面的技术和先进国家相比还存在着很大的差距,对管道防腐检测技术投入足够的精力,才能够缩小和国外技术上的差距,增强我国管道腐蚀检测的实力。

3.3 确保阴极的准确到位

在对管道进行电化学反应保护时我们要确保阴极的准确到位,才能够保障腐蚀的是充当阳极的其他金属,而不是消耗阴极的管道金属。要确保阴极的准确到位,我们必须要关注阴极保护的关键参数。保护电流和保护电位是对阴极进行保护的关键参数,保护电位是金属完全停止腐蚀时所需要的电位,保护电流则是被保护的结构单位面积中所需要的保护电流。只有准确的把握了阴极保护的关键参数,才能够确保阴极保护的准确到位,对管道的保护才能够得到保障。

四、结语

管道的防腐不仅关系到资源的有效利用,还关系到城市的正常运转。保证管道不被腐蚀才能保证社会的平稳运行,因此管道的防腐问题应该引起足够的重视,在开发新技术新材料的同时,注意对于现有工艺的改善,完善管道施工中的管理,避免人为因素对管道造成腐蚀,从多个方面综合治理管道的腐蚀问题,才能将损失降到最低。

参考文献:

[1]刘佳 天然气管道的腐蚀原因及防治措施 2012年第6期 内江科技

[2]冯士明,胡延新.油气管道腐蚀现状及修复技术对策.99中国国际腐蚀控制大会论文集,1999

篇12

20世纪20年代弗莱明博士从青霉菌中发现青霉素揭开了有目的地利用微生物次生代谢产物的序幕。经过80多年的研究,目前已经报道的具有生物活性的微生物次生代谢产物达到了20 000个以上[1]。其中,一些具有重要的生物活性的微生物天然产物已被开发成为医药、农药[2-4],如青霉素、头孢菌素、他汀类药物、环孢菌素A、阿维菌素、Strobilurin类杀菌剂等,在农药及医药中占据了相当大的比重。微生物天然产物成为新药开发的重要源泉。尽管跨国医药企业在20世纪90年代对天然产物研究与开发的兴趣曾经一度下降,但由于组合化学及高通量筛选并未为其带来预期的结果,这些企业对天然产物的研究已经在复苏,天然产物在新药的研究与开发中发挥着重要的作用[5-10]。

据估计,开发一种新药平均要花10~15年的时间,总费用已超过10亿美元[11]。在从微生物天然产物中进行药物筛选研究时,研究者经常会碰到已知的化合物或不感兴趣的化合物。为了避免不必要的人力、物力及财力的浪费,研究者应尽可能在研究的早期对微生物粗提物中的化合物进行初步鉴别,排除其中的已知化合物或重复的化合物。微生物天然产物早期鉴别及去重复的一般流程见图1。以往人们利用纸层析、薄层层析进行微生物天然产物的早期鉴别及去重复。目前,高效液相色谱(HPLC)已广泛应用于微生物天然产物的早期鉴别及去重复,与高效液相色谱技术联合使用的现代分析技术的发展,使微生物天然产物的早期鉴别及去重复更为方便。而天然产物数据库的建立,则大大简化了微生物天然产物的早期鉴别与去重复的过程。本研究对用于微生物天然产物的早期鉴别及去重复的方法进行总结,以期对微生物天然药物的研究与开发提供一点借鉴。

1 薄层层析

微生物在次生代谢过程中产生复杂的次生代谢产物。这些复杂组分的物理化学性质不同,其在不同的溶剂系统中扩散的速度不同。用于微生物次生代谢产物分离的材料包括纸、硅胶、氧化铝等。事实上,从20世纪40年代开始纸层析技术就被用于微生物产生的化合物的早期鉴别与去重复。在20世纪80年代,Zahner等[12]根据不断增加的薄层层析(TLC)色谱及显色剂知识,提出了一个基于薄层层析的微生物天然产物的筛选策略——化学筛选。微生物提取物经薄层硅胶层析展开后,可在紫外及可见光下记录层析样品的层析情况;另外,利用多个显色剂对层析后的样品进行显色。通过与数据库中已知化合物进行对比,可初步确定样品中的化合物是否为数据库中的化合物。该方法在德国汉高研究所(HKI)和HOECHST制药公司得到运用,利用该方法对8 000株微生物进行了筛选,分离到259个化合物,其中129个化合物是新结构化合物。新化合物分离的比率达到50%[13]。云南大学微生物研究所李铭刚等[14,15]通过与HKI合作,利用其TLC数据库对一株嗜碱放线菌的次生代谢产物进行了早期鉴别,从中分离到了两个活性化合物。Filtenborg等[16,17]也采用TLC方法,结合可见光、紫外线及显色剂,对真菌产生的毒素进行了筛选。但是该方法的最大缺陷是分辨率不高、自动化水平不高,特别是对一些未知化合物缺乏有效的鉴别手段,对化合物的快速鉴别依赖于数据库中化合物的数量。

2 液相色谱(LC)技术与光谱技术联用

20世纪60年代末至70年代初,科克兰(Kirkland)等人开发了世界上第一台商业高效液相色谱仪,开启了HPLC时代[18]。随着技术的发展,如柱料的改进、高压泵的应用,HPLC技术的分离效果提高迅速,而与计算机联用则大大提升了高效液相色谱的自动化程度。LC技术已广泛应用于生物活性物质的分离、纯化。将具高分离性能的LC技术与能够获取丰富化学结构信息的光谱技术相结合,通过一次或少数几次分析即可全面地获得整个微生物粗提物的化学组成、含量及结构等信息,在研究的早期即鉴别或鉴定出化合物的结构及预测出新化合物的存在,达到对生物活性物质进行快速筛选的目的,大大促进了微生物来源的有生物活性的新化合物的发现。

2.1 与紫外光谱联用(LC-UV)

微生物粗提取物通过色谱柱分离后,含有某一特定化合物的流动相在通过光电二极管阵列检测器时,计算机的色谱工作站可获得这一化合物的紫外光谱图。色谱工作站可将获得的紫外图谱存储在计算机中,并可与建立的已知或标准化合物的紫外图谱库进行比对,快速确定该化合物是否为已知化合物。此外,紫外光谱还可提供一些被检测的化合物的结构信息。液相与紫外光谱技术的联用,已广泛应用于微生物天然产物的化学筛选,研究者利用这一手段结合生物活性筛选,从微生物中发现了一些新的生物活性化合物[19-31]。德国Goettingen大学的Laatsch教授研究小组建立了天然产物标样及分离的天然活性化合物的紫外图谱库,用于微生物天然产物的早期鉴别与排重。受到资源的制约,这种自建的数据库中化合物的数量相对较小。丹麦理工大学的研究者建立了自动比较LC所得到的化合物紫外图谱的方法,并利用此方法发现了两个新的化合物[32,33]。随着LC技术的发展,超高效液相色谱(UPLC)在微生物天然产物分析中的应用越来越广泛。利用UPLC与光电二极管阵列检测器联用,可更为迅速地进行微生物粗提取物中化合物组成的分析[34]。光电二极管阵列检测器的缺点在于不能检测不具有发色基团的微生物天然产物。此外,由于可供分析的已知化合物的数量有限,采用此种方法能够剔除的仅为已有的化合物。

2.2 与质谱联用(LC-MS)

质谱仪具有灵敏度高的特点,通常可检测到纳克乃至皮克级的化合物,可获得被检测化合物的分子量与结构信息。高分辨质谱(MS)还可确定被分析的化合物的分子式。与LC联用的质谱仪包括:单四极杆、串联四极杆、离子阱及飞行时间质谱(高分辨)仪等。Fredenhagen等[35]建立了以LC-离子阱质谱仪联用来快速有效地鉴定微生物提取物中原来已分离鉴定的化合物的方法。采用LC-MS对微生物发酵提取物中的化合物进行分析,通过与该数据库中已知天然产物的母离子MS数据进行比较,基本上可以确定微生物发酵提取物中是否有新的化合物。Si等[36]采用LC/ESI-MS/MS对来源于藤黄灰链霉菌发酵液的次生代谢产物进行化学筛选,鉴定出了46种异戊他定系列氨基寡糖类成分,其中41种为新化合物。在该LC-MS分析结果的指导下分离得到了其中11个化合物的单体,经核磁共振(NMR)分析等手段确认了它们的结构,均与LC-MS提示的结构相一致。Feistner[37]采用液质联用对Erwinia属细菌的代谢物组成进行了分析。Nielson等[38]利用液相色谱-紫外与高分辨飞行时间质谱,建立了一个快速有效的鉴别真菌次生代谢产物及其分子组成的方法。Kim等[39]利用液质联用对4株Myxococcus xanthus的次生代谢产物进行了鉴别,从中发现了一个新化合物Myxalamid K。而利用超高效液相色谱-质谱联用,可以更加快速地对微生物提取物中的化合物进行鉴别。Berrue等[40]利用UPLC-MS建立了Erythropodium caribaeorum珊瑚的主要代谢产物的UPLC-MS数据库。利用UPLC-MS,他们从该珊瑚的附生微生物中快速筛选到了产生目标化合物的微生物菌株。Ito等[41]利用UPLC-MS对16 025个微生物提取物进行了分析,利用ACD IntelliXtract软件对得到的液质分析数据进行了处理,从提取物中发现了38 000多个不同的化合物峰。而将这些化合物的相关信息整合,形成了一个数据库[41]。德国的Goettingen大学建立了1 000多个微生物天然产物的ESI MS/MS数据库,用于化合物的早期鉴别[42]。还有的研究者利用电喷雾质谱仪直接进样,对微生物提取物的化合物组成进行分析[43-45]。

由于质谱仪本身的局限性,其所得到的结构信息不足以解决化合物的鉴定问题;另外,不同的化合物对离子化条件要求不同;与液相联用时对流动相的要求较高,不宜使用不挥发性缓冲盐。因此,单纯依赖LC-MS联用仍不能解决微生物天然产物的早期鉴别与去重复等问题。

2.3 与核磁共振谱联用(LC-NMR)

NMR技术是用于结构鉴定的最为有效的手段。将NMR与LC结合起来,利用LC对化合物的高效分离,对目标化合物的结构进行鉴定。LC-NMR的操作模式有3种:连续流(Onflow)、停流(Stopped flow)及峰贮存(Loop-storage)[46,47]。NMR的灵敏度相对质谱来说较低,通常最低只能检测微克级的样品。但是随着技术的进步,在LC与NMR联用的硬件及软件方面取得了显著进展,如核磁共振仪的磁场强度达到900 A/m,专为联用设计的流通探头、毛细管探头、超低温探头等,可提升检测的灵敏度,在某些模式下可以检测微克以下的样品[42,48,49]。NMR可以获得所分析化合物的部分甚至是全部结构信息,可在研究的早期确定所研究的化合物是否为已知化合物或初步确定新化合物的结构。该技术目前已经应用于微生物天然产物粗提物的早期鉴别与去重复[42,48,50,51]。该方法还存在一些不足,主要表现在:①灵敏度仍然较低;②对复杂的样品分析存在难度(主要是色谱分离);③溶剂峰的影响。这些都还有赖于仪器技术进步来解决。

2.4 液相与多种光谱技术联用

将高效液相色谱与多种光谱技术联用,可同时获得所分析化合物较为完整的各种信息。不同的光谱技术的联合运用,可弥补LC与单一光谱技术联用所存在的缺陷,获得微生物粗提物中化合物较为完全的结构信息,结合数据库检索,可快速确认目标化合物是否为已知化合物或新化合物[52,53]。Lang等[42,48]建立了液相与多种光谱技术联用的真菌提取物中已知化合物去重复的方法。对具有抗细菌、抗真菌或细胞毒性的真菌或细菌提取物,先采取LC-UV分析,并结合生物测定,对得到的活性峰对应的紫外光谱和保留时间与建立的已知化合物紫外光谱数据库进行比较。如果未发现匹配的化合物,则将得到的质谱和(或)紫外信息输入到MarinLit或Antibase等数据库中进行查询。对仍然不匹配的化合物,则将根据1H NMR图谱解析得到的部分结构信息输入到Anti/Marin数据库中进行检索,可快速确定化合物是否为已知化合物。利用该方法,他们从一株内生真菌中鉴定出Phomosine A、Phomosine C及其他的Phomosine衍生物。

3 天然产物数据库在早期鉴别及去重复中的应用

一旦对微生物粗提物进行了各种分析,并获得了一些与其结构相关的信息后,如何快速有效地确认其是否为已知化合物是研究者所要解决的首要问题。利用这些数据与信息,若直接从文献(论文及专利)中查找则费时费力。为了快速地鉴别微生物粗提物中的化合物,可利用一些公共数据库,如SciFinder、ChemBank、ChemID、PubChem等[54]。但是这些公众数据库只能提供化合物的名称、结构、化学特性、用途、生物学活性等。这些在线的公众数据库在确定一个已明确结构的化合物是否为新化合物时非常方便。但是这些数据与通过仪器分析所得到的数据不能很好地衔接。

目前,用于微生物天然产物早期鉴别与去重复的数据库主要是一些专业的商业数据库,包括The Dictionary of Natural Products、Antibase 2012、Berdy Bioactive Natural Products Database、UMEZAWA DB、MarinLit等。此外,商业化合物数据库,如CAS、Reaxys也包含了大量的天然产物的数据[54,55]。由Chapman&Hall开发的Dictionary of Natural Products可提供DVD版及网络版,其最新版中包含了23万多个天然产物的化学、物理及结构数据,如化合物的精确名称及通用名、分子式、分子量及元素组成、化学结构、紫外及化合物来源、化合物的物理性质(如熔点、沸点、旋光性、生物活性及毒性等),基本包含了Berdy Bioactive Natural Products Database的信息。该数据库每半年更新一次[56]。Antibase数据库由德国Gottingen大学Laatsch教授领导的团队开发,Wiley出版集团发行,为软件版。该数据库包含了30 000多个微生物来源的产物,包括了微生物天然产物的分子式、分子量、元素组成、理化性质、光谱数据、生物活性数据及来源(含相关的文献),并能够提供结构查询。该数据库为每年更新一次[57]。日本在微生物天然产物的研究与开发方面开展了大量的工作,也开发了一些专门针对微生物天然产物的数据库。日本北里大学北里研究所微生物化学实验室开发的新北里化学数据库,包括了16 000种微生物次生代谢产物,该数据库可与DOS兼容,包含了化合物的物理化学性质,但是没有化学结构[58]。日本的Bioscience AssociatesTM开发的基于Microsoft Office Acess的UMEZAWA DB,其前身为ActFund,包括了16 000多个微生物天然产物的物理、化学及生物学特性,可采用紫外、分子量及分子式进行查询[59]。日本理化研究所(RIKEN)开发了一个微生物天然产物数据库,包括16 000多个化合物,可提供化合物名称、结构、分子式、分子量、产生菌、生物活性及化合物的基本特性等[60]。MarinLit由新西兰Canterbury大学开发并维护,该数据库收集了约22 000个海洋天然产物的相关信息,其中包含了一部分海洋微生物天然产物的信息[42]。该大学与德国Goettingen大学合作,将MarinLit数据库与Antibase数据库整合,形成了一个包括50 000多个化合物的数据库AntiMarin。该数据库中可提供1H NMR图谱所推导的结构信息的查询,每年更新一次[42]。中国医学科学院药物所于20世纪80年代开始,逐步建立了基于Foxbase的微生物产物数据库MPMS。2000年后通过与上海创腾科技合作,利用MDL公司的ISIS化学信息管理系统作为开发平台,对原有的数据库进行了更新,开发了新一代的微生物天然产物数据库(MNPD)。该数据库收集了微生物天然产物共15 000多个,主要包括微生物天然产物的名称、分子式、分子量、结构类型、CAS登记号、颜色、晶型、熔点、旋光度、溶解性、紫外和红外特征吸收峰等重要理化性质、微生物天然产物的产生菌、制备方法及生物活性、相关原始参考文献及专利信息[61]。还有研究者根据研究所得到的数据自主进行天然产物数据库的开发。Lopez-Perez等[62]开发了一个包含6 000多个天然产物的13C图谱的数据库NAPROC-13,可用于已知天然产物的快速结构鉴定,也可为未知化合物的结构解析提供帮助。

4 结语

微生物天然产物仍将在新药研究与开发中发挥重要的作用。而在研究的早期对已知化合物进行有效鉴别与去重复是发现具有新结构的活性化合物的关键。结合活性筛选,运用薄层层析、液相-光谱联用,在研究的早期获得微生物粗提物中的活性化合物的相关信息,并通过数据库比对,可快速进行已知化合物的鉴别与去重复,并加速新活性化合物的结构解析。但是所有的技术都有其局限性,前文谈到了各种技术都存在这样或那样的问题,任何单一的技术都不可能完全解决微生物粗提物中所有的化合物的早期鉴别与去重复,特别是那些极微量的化合物。而针对这些技术的改进,将极大地促进具有新结构的微生物源生物活性天然产物的发现,从而推动药物研究开发与新药创制。

参考文献:

[1] BERDY J. Bioactive microbial metabolites[J]. J Antibiot,2005, 58(1):1-26.

[2] NEWMAN D J, CRAGG G M. Natural product scaffolds as leads to drugs[J]. Future Med Chem,2009,8:1415-1427.

[3] NEWMAN D J, CRAGG G M. Natural products as sources of new drugs over the 30 years from 1981 to 2010[J]. J Nat Prod,2012,75(3):311-335.

[4] COPPING L G, DUKE S O. Natural products that have been used commercially as crop protection agents[J]. Pest Management Science,2007,63:524-554.

[5] KOEHN F E, CARTER G T. The Evolving role of natural products in drug discovery[J]. Nature Review-Drug Discovery,2005,4:206-220.

[6] BUTLER M S. The role of natural product chemistry in drug discovery[J]. J Nat Prod, 2004, 67:2141-2153.

[7] CARTER G T. Natural products and pharma 2011: Strategic changes spur new opportunities[J]. Nat Prod Rep,2011,28:1783-1789.

[8] PFEFFERLE C, SUESSMUTH R D. Natural compounds as a source of an efficient drug screening[J]. Screening,2003,(5):2-4.

[9] TULP M,BOHLIN L. Rediscovery of known natural compounds: nuisance or goldmine[J]. Bioorg Med Chem,2005,13:5274-5282.

[10] PATERSON I, ANDERSON E A. The renaissance of natural products as drug candidates[J]. Science,2005,310:451-453.

[11] MORGAN S, GROOTENDORST P, LEXCHIN J,et al. The cost of drug development: A systematic review[J]. Health Policy,2011,100:4-17.

[12] ZAHNER H, DRAUTZ H, WEBER W. Novel approaches to metabolite screening[A]. Bioactive Microbial Products: Search and Discovery[M].New York:Academic Press,1982.51-70.

[13] GRABLEY S, THIERICKE R, ZEECK A. The chemical screening approach[A]. GRABLEY S, et al. Drug Discovery from Nature[M]. Heidelberg:Springer-Verlag,1999.124-148

[14] 李铭刚,INGRID G,李一青,等. 薄层层析指导下的嗜碱放线菌菌株YIMGQ-14次生代谢产物研究[J]. 微生物学报,2003,43(4):481-485.

[15] 刘祝祥,李铭刚,孙 秋,等.化学筛选在微生物天然产物研究中的应用[J]. 云南化工,2004,31(4):44-46.

[16] FILTENBORG O, FRISVAD J C, SVENDSEN J A. Simple screening method for molds producing intracellular mycotoxins in pure cultures[J]. Appl Environ Microbiol,1983,45:581-585.

[17] FRISVAS J C, FILTENBORG O, THRANE U. Analysis and screening for mycotoxins and other secondary metabolites in fungal cultures by thin-layer chromatography and high-performance liquid chromatography[J]. Arch Environ Contam Toxicol,1989,18:331-335.

[18] 杨先碧,阮慎康. 高效液相色谱发展史[J]. 化学通报,1998,11:56-60.

[19] FIEDLER H P. Biosynthetic capacities of actinomycetes 1 Screening for secondary metabolites by HPLC and UV-visible absorbance spectral libraries[J]. Natural Product Letters, 1993,2(2):119-128.

[20] FIEDLER H P, KULIK A, SCHUETZ T, et al. Biosynthetic capacities of actinomycetes 2. Juglomycin Z, a new naphthoquinone antibiotic from Streptomyces tendae[J]. J Antibiot, 1994,47(10):1116-1122.

[21] VOLKMANN C, HARTJEN U, ZEECK A, et al. Biosynthetic capacities of actinomycetes 3. Naphthgeranine F, a minor congener of the Naphthgeranine group produced by Streptomyces violaceus[J]. J Antibiot,1995,48(6):522-524.

[22] PFEFFERKE C, KEMPTER C, METZGER J, et al. (E)-4-oxonon-2-enoic acid, an antibiotically active fatty acid produced by Streptomyces olivaceus Tii 4018[J]. J Antibiot,1996, 49(8):826-828.

[23] PFEFFERLE C, BREINHOLT J, GUERTLER H, et al. Hydroxy-4-methoxy-2-naphthoic acid, a herbicidal compound produced by Streptosporangium cinnabarinum ATCC 31213[J]. J Antibiot,1997,50(12):1067-1068.

[24] FIEDLER H P, NEGA M, PFEFFERLE C. Kanchanamycins, new polyol macrolide antibiotics produced by Streptomyces olivaceus Tii 4018 I. Taxonomy, fermentation, isolation and biological activities[J]. J Antibiot,1996,49(8):758-764.

[25] BERTASSO M, HOLZENKAEMPFER M, ZEECK A, et al. Bagremycin A and B, novel antibiotics from Streptomyces sp. Tu 4128[J]. J Antibiot, 2001,54(9):730-736.

[26] SCHIMANA J, FIEDLER H P. Simocyclinones, novel cytostatic angucyclinone antibiotics produced by Streptomyces antibioticus Tii 6040[J]. J Antibiot,2000,53(8):779-787.

[27] GEBHARDT K, SCHIMANA J, HOLTZEL A, et al. Aspochalamins A-D and aspochalasin Z produced by the endosymbiotic fungus Aspergillus niveus LU 9575[J]. J Antibiot,2004,57(11):707-714.

[28] NACHRIGALL J, KULIK A, HELALY S, et al. Atacamycins A-C, 22-membered antitumor macrolactones produced by Streptomyces sp. C38[J]. J Antibiot,2011,64:775-780.

[29] BAUR S, NIEHAUS J, KARAGOUNI A D, et al. Fluostatins C_E, novel members of the fluostatin family produced by Streptomyces strain Acta 1383[J]. J Antibiot,2006,59(5):293-297.

[30] BREINHOLT J, KULIK A, GUERTLER H, et al. Tigloside: a new tigloylated tetrasaccharide from Amycolatoosis sp[J]. Acta Chemica Scandinavica,1998,52:1239-1242.

[31] BURKHARDT K, FIEDLER H P, GRABLEY S, et al. New cineromycins and muscacins obtained by metabolite pattern analysis of Streptomyces griseoviridis (FH-S 1832) I. Taxonomy, fermentation, isolation and biological activity[J]. J Antibiot,1996,49:432-437.

[32] HANSEN M E, SMEDSGAARD J, LARSEN T O. X-Hitting: an algorithm for novelty detection and dereplication by UV spectra of complex mixtures of natural products[J]. Anal Chem,2005,77(21):6805-6817.

[33] LARSEN T O, PETERSEN B O, DUUS J O, et al. Discovery of new natural products by application of X-hitting, a novel algorithm for automated comparison of full UV spectra, combined with structural determination by NMR spectroscopy[J]. J Nat Prod,2005,68:871-874.

[34] KAMENIK Z, HAHCEK F, MARECKOVA M, et al. Ultra-high-performance liquid chromatography fingerprinting method for chemical screening of metabolites in cultivation broth[J]. J Chrom A,2010,1217(51):8016-8025.

[35] FREDENHAGEN A A, DERRIEN C C, GASSMANN E E. An MS/MS library on an ion-trap instrument for efficient dereplication of natural products. Different fragmentation patterns for [M+ H]+ and [M+Na]+ ions[J]. J Nat Prod,2005, 68(3):385-391.

[36] SI D Y, ZHONG D F, CHEN X Y. Profiling of isovalertatin family aminooligocsaccharides extracted from the culture of Streptomyces luteogriseus by using liquid chromatography/electrospray ionization mass spectrometry[J]. Anal Chem, 2001,73:3808-3815.

[37] FEISTNER G J. Profiling of bacterial metabolites by liquid chromatography-electrospray mass spectrometry: a perspective[J]. Am Lab (Fairfield, Conn.) 1994(September):32L-32Q.

[38] NIELSEN K F, SMEDSGAARD J. Fungal metabolite screening: database of 474 mycotoxins and fungal metabolites for dereplication by standardised liquid chromatography-UV-mass spectrometry methodology[J]. J Chrom A,2003,1002(1-2):111-136.

[39] KIM J, CHOI J N, SOK D E, et al. LC-MS/MS profiling-based metabolite screening of Myxococcus xanthus[J]. J Microbiol Biotechnol,2009,19(1):51-54.

[40] BERRUE F, WITHERS S T, HALTLI B, et al. Chemical screening method for the rapid identification of microbial sources of marine invertebrate-associated metabolites[J]. Mar Drugs,2011,9:369-381.

[41] ITO T, ODAKE T, KATOH H, et al. High throughput profiling of microbial extracts[J]. J Nat Prod, 2011,74:983-988.

[42] LANG G, MAYHUDIN N A, MITOVA M I, et al. Evoling trends in the dereplicaiton of natural product extracts: New methodology for small-scale investigation of natural product extracts[J]. J Nat Prod,2008,71:1595-1599.

[43] HIGGS R E, ZAHN J A, GYGI J D, et al. Rapid method to estimate the presence of secondary metabolites in microbial extracts[J]. Appl Environ Microbiol,2001,67(1):371-376.

[44] ZAHN J A, HIGGS R E, HILTON M D. Use of direct-infusion electrospray mass spectrometry to guide empirical development of improved conditions for expression of secondary metabolites from actinomycetes[J]. Appl Environ Microbiol,2001,67(1):377-386.

[45] SMEDSGAARD J, FRISVAD J C. Using direct electrospray mass spectrometry in taxonomy and secondary metabolite profiling of crude fungal extracts[J]. J Microbiol Methods,1996,25:5-17.

[46] EXARCHOU V, KRUCKER M, VAN BEEK T A, et al. LC-NMR coupling technology: recent advancements and applications in natural products analysis[J]. Magnetic Resonance in Chemistry,2005,43(9):681-687.

[47] BOBZIN S C, YANG S, KASTEN T P. LC-NMR: A new tool to expedite the dereplication and identification of natural products[J]. J Ind Microbiol Biotechnol,2000,25(6):342-345.

[48] MITOVA M I, MURPHY A C, LANG G, et al. Evolving trends in the dereplication of natural product extracts 2. The isolation of chrysaibol, an antibiotic peptaibol from a New Zealand sample of the mycoparasitic fungus Sepedonium chrysospermum[J]. J Nat Prod,2008,71(9):1600-1603.

[49] JASMA A, CHUAN T, et al. Automated microflow NMR: routine analysis of five-microliter samples[J]. Anal Chem,2005,77(19):6509-6515.

[50] PAULI G F, JAKI B U, LANKIN D C. Quantitative 1H NMR: Development and potential of a method for natural products analysis[J]. J Nat Prod,2005,68:133-149.

[51] ABEL C B L, LINDON J C, NOBLE D, et al. Characterizationof metabolites in Intact Streptomyces citricolor culture supernatants using high-resolution nuclear magnetic resonance and directly coupled high-pressure liquid chromatography-nuclear magnetic resonance spectroscopy[J]. Anal Biochem,1999,270(2):220-230.

[52] CORCORAN O, SPRAUL M. LC–NMR-MS in drug discovery[J]. Drug Discovery Today, 2003,8(14):624-631.

[53] LIN Y, SCHIAVO S, ORJALA J, et al. Microscale LC-MS-NMR platform applied to the identification of active Cyanobacterial metabolites[J]. Anal Chem,2008(80):8045-8054.

[54] CORLEY D G, DURLEY R C. Strategies for database dereplication of natural products[J]. J Nat Prod,1994,57(11):1484-1490.

[55] FUELLBECK M, MICHALSKY E, DUNKEL M, et al. Natural products: sources and databases[J]. Nat Prod Rep,2006,23:347-356.

[56] BUCKINGHAM J. Dictionary of natural products on DVD[M/CD]. Chapman and Hall/CR, 2011C.

[57] LAATSCH H. Antibase 2012-The natural compound identifier[M/CD]. Wiley,2012.

[58] LANGE L. Microbiall metabolites-an infinite source of novel chemistry[J]. Pure and Appl Chem,1996,68(3):745-748.

[59] Umezawa Database 2007[DB/OL]. Bioscience Associates, Tokyo 2007. http://.

篇13

1材料与方法

1.1 材料与仪器

蕨菜:采自六盘山区,80℃烘干,粉碎过80目药典筛。

试剂(分析纯):葡萄糖,硫酸,苯酚,氯仿,无水乙醇,正丁醇,过硫酸钾,ABTS等。

仪器:红外分光光度计,UV7501紫外可见分光光度计,高速离心机,冷冻干燥器,索氏提取器

1.2试验设计

1.2.1蕨菜多糖的提取[9] -[10]

称取干燥粉碎后的蕨菜细粉20g,置索氏提取器中,依次用石油醚提取至提取液无色为止。残渣挥干溶剂后,加入200ml蒸馏水回流提取2h,趁热过滤,重复3次。合并滤液,减压浓缩至原体积的1/2后,用4倍量的无水乙醇沉淀过夜,5000r/min离心10min,沉淀冷冻干燥为粗多糖。

1.2.2蕨菜多糖的精制:

将粗多糖加100ml热水溶解,用Sevage法(氯仿:正丁醇=4:1)法除蛋白质;浓缩多糖溶液,加入无水乙醇使含醇量高达80%,静置过夜,5000r/min离心10min,沉淀依次用95%乙醇、无水乙醇、丙酮、乙醚多次洗涤,冷冻干燥,得到精制多糖。

1.2.3多糖含量得测定:

采用苯酚-硫酸法。

1.2.4结构分析[11] -[13]

1.2.4.1紫外光谱分析: 用紫外光谱扫描仪对多糖组分进行扫描, 测定蕨菜多糖的紫外吸收光谱。

1.2.4.2红外光谱分析[14]: 取1 mg 左右经干燥的多糖样品, 与100 ~ 200 mg 经干燥的KBr 粉末在玛瑙研钵中轻轻研磨均匀, 在红外灯下操作. 经压片机压成薄片, 随即上机测定, 于4 000 ~ 400 cm-1红外光谱仪扫描。

2结果与分析

2.1蕨菜多糖的提取结果:

蕨菜粗多糖为浅灰色,无味。易溶于水,热水中溶解度增大。不溶于丙酮、乙醚等非极性溶剂。干燥粉碎后的蕨菜细粉20g按法提取得到多糖1.248g,最终测定多糖得率为6.24%。

2.2紫外光谱分析:

我们在蕨菜多糖的紫外吸收光谱的260nm和280nm处未观察到任何吸收峰;而此处的吸收峰主要是核酸和蛋白质[15],所以我们确定用Sevage法除蛋白后的蕨菜多糖中不含核酸、蛋白质。

2.3红外光谱分析: 根据图(1)我们在蕨菜多糖的红外吸收光谱中,发现在3600-3200cm-1, 3000-2800cm-1, 1400-1200cm-1, 1200-800cm-1,均有多糖特征峰;在891 cm-1处的吸收峰表明多糖结构中存在β吡喃糖苷键,3400 cm-1处出现的强而宽的峰显示蕨菜多糖中存在-OH,1600 cm-1处的峰是C=O伸缩振动引起的吸收[16]- [18]。

3结论

依据上述光谱分析,再结合Smith降解法等化学方法[19]:我们初步确定蕨菜多糖的一级结构中主要含有葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、木糖、甘露糖,而具有β-D(1、4)连接的吡喃葡聚糖主链。

参考文献

[1]王新华,赵恒田,盛庆军. 蕨类山野菜人工繁殖及其研究进展[J]. 北方园艺,2004( 6) :4-5.

[2] 左茹娟,王铭裕,卫振华,等. 兴隆山自然保护区野菜资源利用现状与开发前景[J]. 中国野生植物资源,2006( 6) :26-28.

[3] 许广波,李艳茹,石铁源,等. 延边地区野生蕨菜资源及其研究进展[J]. 中国野生植物资源,2000( 6) :30-31.

[4] 李梅,刁治民,马海斌. 青海蕨菜资源及栽培技术[J]. 青海草业,2001( 3) :51-52.

[5] 杨成生,朱红斌,薛睿,等. 采摘方式对蕨菜资源更新的影响[J]. 甘肃林业科技,2006( 2) :50-51.

[6] 黄利斌,史纪明. 江苏森林野生蔬菜———蕨菜的开发利用[J]. 江苏绿化,1997(4):9-10.

[7] 郝丽珍,邵世勤,王萍,等. 蕨菜的营养成分及其利用研究[C]. 哈尔滨:中国园艺学会第四届青年学术讨论会论文

集,2000.

[8] 许广波,李艳茹,石铁源,等. 延边地区野生蕨菜资源及其研究进展[J]. 中国野生植物资源,2000,19(6):30-35.

[9] 张帆,罗水忠,高宝莼,等. 蕨菜的化学成分研究[J].天然产物研究与开发,2004,16(2):121-123.

[10] 井泽良,刘兴华,关文强.真菌寡聚糖单糖组成( H PLC) 分析及诱导抗病活性初步研究[J].食品研究与开发,2006,27(1):53-56.

[11] 刘长福,刘涛,刘秀梅.高效液相色谱法测定香菇多糖的分子量[J].化学工程师,2005,118(7):28-29.

[12] 颜军, 郭晓强, 邬晓勇, 等. 非衍生化H PLC 法分析银耳多糖中单糖组成的初步研究[J].食品科学,2007,28(7):446-449.

[13] 戴金凤,李磊.紫萁多糖单糖组成及摩尔比G C 分析[J].江西农业大学学报,2001,23(4):492-495.

[14] Edge C J,R adem acher T W ,W orm ald M R ,et al.Fast Sequencingof O ligosacchrides: the R eagent-array A nalysis M ethod [J]. ProcN atlA cad Sci,1992,89(4):6 338-6 342.

[15] 李尔春 天然植物多糖的结构及活性研究进展〔J].食品工程,2007,(1);44一46

[16]孟聚诚,高芳,李广林,等.8301多糖的纯化及光谱分析[J].中兽医医药杂志.1999,2;5 6